【摘 要】
：
背景与目的乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus,HBV）持续感染引发慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B,CHB）,可进一步发展为肝硬化及肝癌,严重危害人类健康。HBV感染促进免疫检查点分子表达,介导免疫功能紊乱,是机体不能有效清除HBV的重要原因。肝脏作为HBV感染的靶器官,与肠道关系密切。HBV相关多种慢性肝病伴随肠道菌群紊乱,干预菌群影响HBV复制。此外,越来越多
论文部分内容阅读
背景与目的乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus,HBV）持续感染引发慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B,CHB）,可进一步发展为肝硬化及肝癌,严重危害人类健康。HBV感染促进免疫检查点分子表达,介导免疫功能紊乱,是机体不能有效清除HBV的重要原因。肝脏作为HBV感染的靶器官,与肠道关系密切。HBV相关多种慢性肝病伴随肠道菌群紊乱,干预菌群影响HBV复制。此外,越来越多的临床及动物研究发现,免疫检查点分子阻断治疗影响肠道菌群,而肠道菌群的差异也会影响免疫检查点阻断的治疗效果。免疫检查点分子 Tim-3（T cell immunoglobulin and mucin domain-containing protein 3）在多种免疫细胞表达,是抗肿瘤和抗病毒治疗的潜在靶点。近期研究报道,口服抗生素影响Tim-3阻断抗体的抗肿瘤效果。我们及其他实验室研究证明阻断Tim-3显著促进HBV清除,但Tim-3是否影响肠道菌群,肠道菌群是否参与Tim-3阻断抗体促进HBV清除的作用,迄今尚不明确。本论文研究肠道菌群在Tim-3抑制HBV清除中的作用,以期为阐明HBV免疫逃逸及HBV阻断提供实验依据。方法与结果1.Tim-3抑制HBV清除部分依赖于肠道菌群通过水动力注射（hydrodynamicinjection,HDI）AAV/HBV1.2 质粒构建 HBV 感染模型。血清学指标检测结果显示,与对照小鼠（WT）相比较,Tim-3 KO小鼠HBV清除加快。合笼或饲喂抗生素后WT和Tim-3 KO小鼠间HBsAg的差异显著减少,提示Tim-3抑制HBV清除至少部分依赖于肠道菌群。分离小鼠肝脏单个核细胞,流式细胞术检测结果显示,Tim-3 KO小鼠免疫显著改善,表现为CD4+T细胞、NK细胞显著增多,CD8+T、CD4+T细胞分泌IFN-γ显著增加。2.Tim-3影响肠道菌群的丰度和组成分离Tim-3 KO及WT小鼠粪便微生物,对粪便细菌进行厌氧培养24h,发现Tim-3 KO小鼠粪便的菌落数显著高于WT小鼠。16S rRNA测序分析显示,Tim-3 KO小鼠肠道菌群多样性显著高于WT小鼠,且两者的肠道菌群组成有显著差异。3.Tim-3 KO小鼠肠道中明显富集色氨酸代谢产物黄尿酸,黄尿酸促进HBV清除对Tim-3 KO及WT小鼠粪便进行非靶代谢组学检测,结果显示WT、Tim-3 KO小鼠肠道内菌群代谢产物存在显著差异,其中Tim-3 KO小鼠肠道中色氨酸代谢产物黄尿酸（Xanthurenic Acid,XA）显著增加。进一步对HBV模型小鼠进行黄尿酸灌胃,发现黄尿酸可以显著加快HBV的清除。肝脏组织HE染色以及血清ALT、AST检测结果显示,灌胃黄尿酸未造成小鼠肝脏毒性;同时,体外黄尿酸刺激HepG2.2.15细胞,CCK8实验表明,黄尿酸不影响肝癌细胞增殖。4.黄尿酸抑制HBV复制的初步机制研究为探讨黄尿酸抑制HBV的机制,首先分离小鼠肝单个核细胞,流式结果发现,黄尿酸灌胃小鼠肝脏中CD8+T细胞比例显著上升,且NK细胞分泌IFN-γ增加。与此相一致,在体外黄尿酸剂量依赖性促进NK92细胞分泌细胞因子能力。其次,ELISA结果显示,黄尿酸可以剂量依赖性地降低HepG2.2.15细胞上清中HBV抗原的水平。上述结果提示,黄尿酸一方面直接抑制肝细胞内HBV复制,另一方面改善免疫功能促进HBV清除。文献报道,黄尿酸是芳香烃受体AhR和代谢型谷氨酸受体mGluR的配体。进一步用AhR和mGluR抑制剂处理HepG2.2.15细胞,发现mGluR抑制剂LY341495处理后消除了黄尿酸抑制肝癌细胞HBV病毒抗原表达的作用,但AhR抑制剂没有影响。提示,黄尿酸可能通过mGluR促进HBV清除。研究结论本研究首次发现Tim-3影响肠道菌群,且Tim-3抑制小鼠清除HBV部分依赖于肠道菌群。进一步研究显示Tim-3 KO小鼠中富集的菌群代谢产物黄尿酸显著促进HBV清除。上述研究揭示了 Tim-3的新的调控机制,为慢乙肝治疗提供了新思路。
其他文献
基于心电的日常生命体征监护长期在心血管疾病预前和治疗中扮演着重要的角色。但是该监护需要到特定地方由专业人员操作,并且对人体有一定的约束。而由于心冲击图技术具有无创、非接触式以及可长期连续监护等优点,因此基于心冲击信号的监护越来越受到研究人员的关注。从心冲击信号中提取心率是临床监护中的重要问题。然而,当前的心率提取方法还存在准确性低的特点,这阻碍了心冲击信号在临床上的广泛应用。因此本文提出了基于自适
认知机器人是具有仿人高级认知能力的智能机器人,近年来在人工智能领域受到了广泛的关注。认知发育能力能够使机器人在复杂的环境中执行非特定的任务,有助于机器人提高自主化水平并改善人机交互效果,促进机器人更好地为人类服务。认知机器人实现与人类交互、为人类服务的基础是具有与人类相同的知识基础,从而理解人类的指导与行为。因此,本文主要研究认知机器人在日常生活场景中对物体概念的认知发育。认知发育模型需要有实时学
本文采用稀释涂布平板法从不同植物根际土样中分离纯化出20株木霉菌菌株,通过室内平板对峙培养试验得出D1菌株对水稻纹枯病菌的抑制作用较强,抑菌率达80.82%;通过发酵浓缩液对水稻纹枯病菌的抑菌试验得出D1菌株发酵浓缩液对水稻纹枯病菌的抑菌作用较强,抑菌率达69.55%。综合研究结果筛选出D1菌株作为水稻纹枯病生防用木霉菌,经形态学和分子学初步鉴定D1菌株为短密木霉（Trichoderma brev
制造业的高质量发展是中国经济发展的重中之重,以“创新、协调、绿色、开放、共享”为内涵的新发展理念也构成了制造业高质量发展的“指挥棒”。然而,当前我国制造业仍具有粗放式发展的特征,这不仅与高质量发展的理念不符,也造成了环境的破坏。党和国家高度重视生态文明建设,加强对制造业的环境规制。日益严峻的环境规制增加了制造业企业的生产成本,挤占了研发投入与投资,给制造业发展带来了巨大的外部压力。然而,“一个硬币
在很多实际系统中,由于设备限制,性能要求和安全性考虑等因素,系统在运行过程中常常受到一定的限制,即需要满足某些约束条件。约束的破坏可能会导致系统不稳定,系统性能的退化甚至安全事故。同时,约束的存在使控制器设计变得更加复杂。近年来,对高阶非线性系统约束控制的研究引起了广大学者的关注并取得了重大突破,然而在以往的大多数工作中,所考虑的系统幂次都是已知常数,而对带有未知时变幂次的高阶非线性系统约束控制的
本文以能源市场分割作为切入点,分析其对发电企业全要素生产率的影响,同时研究在资源错配存在的情况下,是否还会对发电企业的全要素生产率产生相似的影响,以此分析其作用于发电企业全要素生产率的机制路径。首先,本文采用相对价格法测算了能源要素的市场分割指数,并对其进行了纵向和横向的对比分析;其次,采用0P法测算了发电企业的全要素生产率,并分企业类型讨论了其变动趋势;再次,利用相关数据测算了资源错配指数以及能
当今世界正经历百年未有之大变局,在构建“以国内大循环为主体、国内国际双循环相互促进”的新发展格局下,建设全国统一大市场,引导出口导向型经济转变为内需驱动型经济,对于应对全球经济变化和推动经济高质量发展具有重要意义。畅通国内大循环,就是要疏通阻碍经济循环的关键堵点,逐步释放内需潜力,依靠市场规模优势来支撑经济发展。改革开放四十多年来的历史经验表明,市场机制作用的发挥需要打破地区与地区之间的市场分割,
国有企业的混合所有制改革一直是一个热点话题,自党的十八届三中全会以来,相关的讨论又进入一个新的层次,混合所有制必将得到更充分的发展。创新在经济建设中的重要地位日益凸显,而企业是创新的微观主体,担负着把创新成果转化为具体产品的重任,国有企业是我国企业的排头兵和领军者,在促进创新方面更是责无旁贷。因此,研究混合所有制改革与企业创新的关系有重要的现实意义。本文利用2011-2019年A股上市公司数据开展
较长时间以来,我国地方政府财政收支的预算和决算之间存在较大差距,预决算偏离度居高不下,对经济社会各方面产生了不利影响。2014年8月31日,第十二届全国人大常委会第十次会议表决通过《关于修改＜中华人民共和国预算法＞的决定》（简称新《预算法》）,并于次年1月正式实施,新《预算法》总则中特别指出了要“规范政府收支行为,强化预算约束,加强对预算的管理和监督,建立健全全面规范、公开透明的预算制度”。新《预
研究背景病毒是一类极具感染性的微生物,严格寄生于宿主细胞中,以复制的方式进行繁殖。病毒感染严重威胁人类健康,诱发机体炎症反应、感染组织的病理损伤、功能异常,甚至死亡,已成为世界公共卫生安全的巨大隐患之一。巨噬细胞是机体固有免疫系统的重要组成部分,在固有免疫免疫应答中发挥至关重要的作用,构成人体抵抗病原体感染的第一道防线。一方面,病毒入侵机体时巨噬细胞作为专职吞噬细胞,能够通过其吞噬作用摄取病毒粒子