中药地榆是蔷薇科地榆属植物地榆或长叶地榆的干燥根,具有止血、抗过敏、抗炎、免疫调节、抗氧化、抗肿瘤及止泻等药理作用。中医理论认为生地榆能凉血解毒,而地榆炭则能收敛止血。目前关于地榆炮制前后的药效变化及其具体发挥作用的药效物质尚不完全清楚。本论文研究主要采用谱-效研究的方法筛选地榆中的止血活性物质,同时通过中空纤维-凝血酶亲和萃取实验筛选地榆中的凝血酶作用成分;以及采用谱-效研究的方法对地榆的抗过敏活性成分进行筛选。论文主要包括六个部分的内容。论文的第一部分为文献综述,首先简要介绍了地榆的化学成分与药理作用,其次对中药谱效学的应用进展进行了总结,并对酶的固定化方法及常用载体进行了概述。最后提出本论文研究的主要内容及意义。第二部分为地榆的炮制方法考察及体外止血药效初步评价。首先选择200℃为炮制温度,通过改变烘烤时间(5-40 min,每隔5 min为一组)得到不同地榆炮制品。以凝血三项(TT、PT和APTT)为指标,评价地榆生品及不同炮制品的止血活性。结果发现随着炮制程度的加深,地榆的外观颜色、内部性质及提取率均发生了明显的变化。另一方面,地榆生品及不同炮制品的止血药效也存在一定差异。第三部分是地榆炮制前后止血活性成分的谱效学研究。首先分别对地榆生品及不同炮制品的提取物进行HPLC分析,同时考察各提取物对肝素钠诱导大鼠出血模型的体内止血活性;然后采用典型相关分析找出与止血作用相关性最强的色谱峰,通过LC-MS/MS分析对潜在活性成分的色谱峰进行鉴定,最后采用体外实验对潜在止血活性成分的药效进行评价。实验结果表明,地榆皂苷Ⅰ与地榆的止血作用相关性较强,其止血作用也在体外实验中得到了验证。凝血酶是参与凝血过程的关键酶,可以催化纤维蛋白原转变为纤维蛋白。论文的第四部分采用中空纤维-凝血酶亲和萃取筛选地榆醇提物中的止血活性成分,首先比对空白组与加酶组的HPLC分析结果找出潜在活性成分的色谱峰,再采用LC-MS/MS分析对这些色谱峰所对应成分的化学结构进行鉴定。最终筛选出的潜在活性成分为地榆皂苷Ⅰ,进一步证实地榆皂苷Ⅰ是地榆的主要止血活性物质。第五部分是地榆炮制前后抗过敏活性成分的谱效学研究,采用体外实验比较地榆生品及不同炮制品提取物对透明质酸酶的抑制活性。与第三部分不同的是,本部分研究采用主成分分析法筛选到与透明质酸酶抑制作用相关性最强的色谱峰---野蔷薇苷(rosamultin),该成分具有良好的体外透明质酸酶抑制活性。此外,分别采用软件modeller 9.20,在线服务器Swiss-model、I-TASSER、CPH models-3.2 Server、ROBETTA和MODBASE六种不同的同源建模方法对透明质酸酶的空间结构进行预测,并根据Verified 3D、ERRAT、PROVE和PROCHECK打分情况选取其中最优模型进行分子对接。Autodock对接结果表明,野蔷薇苷与透明质酸酶间存在氢键、范德华力等相互作用。论文的第六部分是结论和展望。本论文主要采用谱-效研究的方法筛选地榆中的止血和抗过敏的活性成分,并对其进行活性验证。论文研究结果不仅为地榆的炮制方法提供了参考,也为地榆在止血和抗过敏方面的应用提供依据。另一方面,本文采用同源建模的方法对透明质酸酶的空间结构进行了探索,为其与小分子物质间的相互作用研究提供支持。