论文部分内容阅读
胃癌是消化系统常见的恶性肿瘤,在我国其死亡率居各种癌症的首位。由于胃癌早期常无特异的症状,早期发现较为困难。相对于消化道其他恶性肿瘤,胃癌易发生淋巴道转移和血道转移,因而预后极差,5年生存率很低。肿瘤转移是在基因调控下多因素参与、多阶段发展的复杂病理过程。现有的研究结果表明,此过程受肿瘤转移相关基因及转移抑制基因、血管和淋巴管生成因子、细胞表面的蛋白多糖、粘附分子、细胞外基质等多种因素的调控。Ezrin蛋白是一种膜-细胞骨架连接蛋白,具有维持细胞形态和运动,连接黏附分子及调节信号转导等功能。通过对许多肿瘤组织的研究发现肿瘤组织中Ezrin蛋白的表达水平都显著高于正常组织,且肿瘤细胞中常有Ezrin蛋白亚细胞定位的改变;在一些转移能力较强的肿瘤细胞中,Ezrin蛋白常呈过表达。现有的研究认为Ezrin蛋白主要通过影响细胞粘附、肿瘤细胞信号转导、细胞凋亡和肿瘤细胞吞噬进而参与到肿瘤浸润和转移的各个环节。基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)是一类锌离子依赖性蛋白酶家族,在体内其主要作用是降解细胞外基质,如间质胶原酶、明胶酶、间质溶素等,MMP-9是该家族中的重要一员。研究发现MMP-9活性上调与恶性肿瘤的浸润转移密切相关,可能是因为其被激活后降解细胞外基质,使肿瘤细胞脱落,导致肿瘤向周围组织浸润并侵入血管、淋巴管而远处转移。肿瘤的生长和转移依赖于肿瘤血管生成。血管生成是肿瘤生长、浸润、转移和复发的基础,丰富的血管不仅增加了肿瘤细胞进入血循环的机率,而且肿瘤细胞还可侵入邻近与毛细血管伴行的淋巴管,促进淋巴道转移。微血管密度(microvessel density,MVD)可以指示肿瘤血管增殖情况,从而判断肿瘤的转移潜能。有关Ezrin蛋白,MMP-9在胃癌中的表达及其与MVD关系的研究,迄今国内外尚未见报道。为此,本研究采用免疫组化SP法,分别检测了52例胃癌、31例癌旁不典型增生组织及21例正常胃黏膜组织中Ezrin蛋白、MMP-9的表达及MVD,并探讨了三者的相互关系。为进一步探讨胃癌的浸润转移机制及寻找有效地抑制胃癌浸润转移途径提供理论依据。方法1.采用免疫组化SP法检测Ezrin蛋白、MMP-9和CD105标记的MVD在正常胃黏膜(n=21)、不典型增生胃黏膜(n=31)及胃癌组织(n=52)中的表达。2.统计学处理:所有数据均采用SPSS 10.0统计学软件进行统计学分析,阳性率之间的比较采用χ~2检验,两组资料均数之间比较用t检验;多组资料之间比较用单因素方差分析;两分类变量之间的关系分析采用spearman等级相关分析表示,以α=0.05为显著性检验水准。结果1.正常胃黏膜、癌旁不典型增生和胃癌组织中Ezrin蛋白的阳性表达率分别为4.8%(1/21),35.5%(11/31),63.5%(33/52);癌组织Ezrin蛋白阳性表达率与相应的癌旁不典型增生组织及正常胃黏膜组织两两相比,差异均有统计学意义(P＜0.01)。2.侵及浅肌层、深肌层和浆膜层的胃癌组织中Ezrin蛋白阳性表达率分别为44.4%(8/18)、52.9%(9/17)和94.1%(16/17),侵及浆膜层的胃癌组织中Ezrin蛋白阳性表达率明显高于前两者,差异有统计学意义(P＜0.01),而侵及深肌层的胃癌组织中Ezrin蛋白阳性表达率与浅肌层组相比差异无统计学意义(P＞0.05)。3.32例伴有淋巴结转移胃癌组织中Ezrin蛋白阳性表达率为81.3%(26/32);而无淋巴结转移20例胃癌组织中Ezrin蛋白的阳性表达率为35.0%(7/20),两组间胃癌组织Ezrin蛋白阳性表达率差异有统计学意义(P＜0.01)。4.正常胃黏膜、癌旁不典型增生和胃癌组织中MMP-9蛋白阳性表达率分别为14.30%(3/21)、48.40%(15/31)和75.00%(39/52);癌组织MMP-9蛋白阳性表达率与相应的癌旁不典型增生组织及正常胃黏膜组织两两相比,差异均有统计学意义(P＜0.016)。5.侵及浅肌层、深肌层和浆膜层的胃癌组织中MMP-9蛋白阳性表达率分别为44.4%(8/18)、58.8%(10/17)和94.1%(16/17)。侵及浆膜层的胃癌组织MMP-9蛋白阳性表达率明显高于前两者,差异有统计学意义(P＜0.016),侵及深肌层的胃癌组织中MMP-9蛋白阳性表达率与浅肌层组相比差异无有统计学意义(P＞0.05)。6.32例伴有淋巴结转移胃癌组织中MMP-9蛋白阳性表达率为81.3%(26/32),而无淋巴结转移20例胃癌组织中MMP-9蛋白阳性表达率为40.00%(8/20),两组间胃癌组织MMP-9阳性表达率差异有统计学意义(P＜0.01)。7.正常胃黏膜、癌旁不典型增生和胃癌组织中,CD105标记的MVD平均值分别为18.10±8.37、35.77±7.82和43.60±8.73,差异有统计学意义(P＜0.001)。癌组织MVD与相应的癌旁非典型增生组织及正常胃黏膜组织两两相比,差异均有统计学意义(P＜0.01)。8.侵及浅肌层、深肌层和浆膜层的胃癌组织中,MVD平均值分别为35.89±6.07、43.18±6.91和52.18±3.28;侵及浆膜层的胃癌组织中MVD明显高于前两者,差异有统计学意义(P＜0.001)。9.32例伴有淋巴结转移的胃癌组织中,MVD平均值为48.53±6.01,而无淋巴结转移的20例胃癌组织中,MVD平均值为35.70±6.11,两组相比,差异有统计学意义(P＜0.001)。10.Ezrin蛋白与MMP-9在胃癌中表达的相关性经统计学分析显示呈显著正相关(P＜0.001);Ezrin蛋白阳性表达组的MVD平均值(47.52±7.72)高于阴性表达组(36.79±5.74),差异有统计学意义(P＜0.001);MMP-9蛋白阳性表达组的MVD平均值(47.62±7.35)高于阴性表达组(36.00±5.51),差异有统计学意义(P＜0.001)。结论1.Ezrin蛋白参与胃癌的发生发展过程并且与胃癌浸润、转移有关。2.MMP-9蛋白参与胃癌的发生发展过程,MMP-9蛋白与胃癌浸润、转移有关。3.胃癌组织中增生的微血管参与胃癌的发生发展并且与胃癌浸润、转移有关。4.Ezrin蛋白、MMP-9蛋白以及胃癌组织中增生的新生血管三者在胃癌的发生、发展及浸润、转移过程中可能起协同作用。