【摘 要】
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强力霉素是生猪养殖过程中常用的治疗用兽用抗生素。经饲强力霉素后,其诱导产生的抗生素抗性基因（Antibiotic resistance gene,ARGs）会随粪便排到体外进入周边环境。因此,本文研究了经饲强力霉素后猪粪中四环素类ARGs的变化规律及其影响因素,为准确评估应用强力霉素的生态毒理学效应、减少动物源ARGs的排放提供理论依据。将27头33.5±0.72 kg的杜×长×大公猪分为3个组,
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目“兽用抗生素胁迫下猪粪堆肥对ARGs的影响机制解析”（3187130503）；
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强力霉素是生猪养殖过程中常用的治疗用兽用抗生素。经饲强力霉素后,其诱导产生的抗生素抗性基因（Antibiotic resistance gene,ARGs）会随粪便排到体外进入周边环境。因此,本文研究了经饲强力霉素后猪粪中四环素类ARGs的变化规律及其影响因素,为准确评估应用强力霉素的生态毒理学效应、减少动物源ARGs的排放提供理论依据。将27头33.5±0.72 kg的杜×长×大公猪分为3个组,每组各9头猪;空白组（CK组）不添加任何兽用抗生素外,另外两个试验组依据《中华人民共和国兽药典》规定分别在饲料中添加3 mg/kg体重（L组）和5 mg/kg体重（H组）的强力霉素,用药期5天,休药期28天。定期采集猪粪,测定强力霉素浓度、猪粪中的ARGs、可移动遗传元件（Mobile genetic genes,MGEs）、微生物群落结构及相关理化指标等。本文所获结果如下:（1）经饲强力霉素后,L组强力霉素浓度于第5天达到峰值,为157.05±16.43mg/kg DM,H组于第4天达到峰值,为272.49±28.24 mg/kg DM。用药期L组和H组的平均浓度分别为117.63±13.54 mg/kg DM和202.03±24.91 mg/kg DM,休药期的平均浓度分别为23.45±10.31mg/kg DM和37.89±16.02 mg/kg DM。试验期第20d时,经饲强力霉素组猪粪中强力霉素低于检测限。（2）猪粪中四环素类ARGs的总相对丰度范围为0.35～0.41 copies/16S r RNA copies,占总ARGs的38.00%～46.47%。经饲强力霉素对四环素类ARGs总相对丰度无显著影响。第5天时,H组猪粪中tet A和tetW的绝对丰度均显著低于L组（P＜0.05）。同时,H组猪粪中多重抗性基因tol C和可移动遗传元件tnp A和int1的绝对丰度显著低于L组（P＜0.05）。第33天时,H组猪粪中tet W的绝对丰度显著低于CK组和L组（P＜0.05）。（3）经饲强力霉素改变了猪粪的微生物群落结构。与CK组相比,用药期时L组中猪粪中布劳特氏菌属、Dorea、副杆菌属和颤杆菌属的相对丰度显著减少（P＜0.05）,未分类的梭菌目的相对丰度显著增加（P＜0.05）;休药期时L组猪粪中链球菌属的相对丰度显著增加,而H组猪粪中Enterorhabdus的相对丰度显著减少（P＜0.05）。在种水平上,Marinobacter adhaerens的显著减少导致了tet A和tol C的显著降低,东洋芽孢杆菌（Bacillus toyonensis）、白色瘤胃球菌（Ruminococcus albus）、大肠弯曲杆菌（Campylobacter coli）等8个物种的显著减少导致了tet W的显著降低。（4）微生物是影响猪粪中四环素类ARGs丰度的重要因素,其次是MGEs、强力霉素浓度和猪粪理化性质。四环素类ARGs与多种MGEs显著正相关（P＜0.05）,如tet S与int1,tetO与tni A和IncQ1。tetL与28个MGEs显著正相关,可能是最容易受MGEs影响的其中一个四环素类ARGs。综上所述,经饲强力霉素并未显著影响四环素类ARGs的总相对丰度,但经饲高浓度强力霉素改变了猪粪微生物群落结构,并导致tet W、tet A和tol C潜在宿主菌的减少,从而导致tetW、tetA和tolC绝对丰度的显著降低。
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