“少阳主骨”对去卵巢骨质疏松大鼠治疗作用的实验研究

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目的:通过实验验证《内经》“少阳主骨”之理论。“肾主骨”与“少阳主骨”是迥然不同的两个观点。一个着眼于脏象,后世也有广泛的临床应用;一个侧重于经脉,至今对其理解和应用仍不为众人所知晓。本实验通过观察电针体表足少阳经穴对去卵巢骨质疏松大鼠的治疗作用;从骨形成、骨吸收和细胞分子生物学等方面的变化,阐明其具有调节骨密度、改善骨质疏松的作用,并初步探讨其途径和机制,为中医学在以后临床防治骨质疏松提供一条新路径。方法:实验动物12月龄Wistar雌性大鼠40只,鼠体重(220±10g)。饲养期间动物室温度(25±1)℃。按完全随机化分成假手术组(Sham group),模型对照组(OVX Control group, OVX-C),电针胆经组(OVX Acupuncture group,OVX-A),电针非经穴组(OVX Non-point Acupuncture group, OVX-N)共4个组,每组10只。假手术组行开腹手术但不摘除卵巢,其余四组实施手术摘除双侧卵巢。手术后,各组大鼠饲以正常饮食。术后3月电针胆经组和电针非经穴组予以行电针针刺治疗。OVX-A经穴处方:阳陵泉、环跳、悬钟、京门。OVX-N选用大鼠后肢内侧非经非穴处(双侧)。OVX-C和Sham group不进行针刺。干预3月后,抽提左股骨总RNA,采用半定量RT-PCR法检测骨细胞中OPG、RANKL和CBFA1mRNA表达的变化。双能X线检测右股骨的骨密度。收集24h空腹尿液检测尿脱氧吡啶啉。心脏取血,采用酶联免疫法检测:血清Ⅰ型前胶原氨基末端肽、血清Ⅰ型胶原交联氨基末端肽、血清骨钙素。结果:1.造模3月且干预3月后,OVX-N和OVX-C中BMD体重校正值较OVX-A和Sham group显著下降,差异有统计学意义(P<0.01);而OVX-A与Sham group; OVX-N与OVX-C之间却无显著性差异(P>0.05)。2.造模3月且干预3月后,OVX-N和OVX-C中OPGmRNA的表达较OVX-A和Sham group明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);而OVX-A与Sham group; OVX-N与OVX-C之间却无显著性差异(P>0.05)。3.造模3月且干预3月后,OVX-C中RANKLmRNA的表达较Sham group明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);OVX-A中RANKLmRNA的表达较OVX-N和OVX-C的值明显降低,均有统计学意义(P<0.05),与假手术组却无显著性差异(P>0.05)。4.造模3月且干预3月后,OVX-N和OVX-C中OPG/RANKLmRNA的表达较Sham group显著下降,差异有统计学意义(P<0.01);而前二者之间却无显著性差异。OVX-A中OPG/RANKLmRNA的表达较OVX-N和OVX-C的值显著升高,均有统计学意义(P<0.01);与Sham group却无显著性差异(P>0.05)。5.造模3月且干预3月后,OVX-A和OVX-N中CBFA1mRNA的表达较Sham group明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);OVX-C中CBFA1mRNA的表达较Sham group显著下降,差异有统计学意义(P<0.01);而前三者之间却无显著性差异。6.造模3月且干预3月后,OVX-C中DPD的含量较OVX-A、OVX-N和Sham group明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);而后三者之间却无显著性差异(P>0.05)。7.造模3月且干预3月后,NTX指标各组间无显著差异(P>0.05)。8.造模3月且干预3月后,OVX-N和OVX-C中PINP的含量较Sham group明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);OVX-A中PINP的含量与Sham group相比却无显著性差异(P>0.05)。9.造模3月且干预3月后,BGP指标各组间无显著差异(P>0.05)。结论:一、电针足少阳胆经穴能提高去卵巢大鼠的BMD体重校正值,使其与假手术组无差异,有治疗绝经后骨质疏松的作用,其主要作用可能通过如下途径:1.电针针刺足少阳胆经穴治疗过程中具有促进骨形成及抑制骨吸收的双向调节作用,以达到防治去势大鼠骨质疏松的目的。可使OVX-A中OPGmRNA、OPG/RANKLmRNA的表达增加而促进骨形成;并且使RANKLmRNA的表达降低而抑制骨吸收。2.通过电针针刺足少阳胆经穴治疗后可从多途径、多靶点使去势大鼠引起的内分泌、骨代谢指标的变化等接近正常水平,达到防治骨质疏松的作用。为临床预防和治疗绝经后骨质疏松症提供理论依据。其表现为:通过电针针刺治疗后可以降低OVX-A中尿DPD的含量,并能提高血液中PINP的含量,使之达到假手术组的水平。二、为“少阳主骨”学说关于足少阳经与骨密度相关和足少阳经穴可自身调节骨密度而治疗骨质疏松的论断提供了实验支持。
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