阿霉素联合二甲双胍应用对舌癌CAL27细胞增殖及凋亡的影响

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目的:研究阿霉素(ADM)与二甲双胍(MET)单独应用及二者联合用药对体外培养的舌癌CAL27细胞增殖以及凋亡的影响。方法:1.依次采用MET药物浓度5mmol/L、10mmol/L、20mmol/L、40mmol/L、80mmol/L、160mmol/L。ADM药物浓度0.02mg/L、0.04mg/L、0.08mg/L、0.16mg/L、0.32mg/L。分别对体外培养的舌癌CAL27细胞作用24h、48h、72h后,用CCK-8法检测各用药组的吸光度值,算出细胞的抑制率,利用SPSS 17.0软件计算出两组药物单独使用时抑制50%细胞生长的浓度IC50;而联合用药组则采取单独用药时所得的ADM组IC50+MET组IC50处理CAL27细胞48h后上酶标仪检测吸光度值,计算出联合用药组的细胞抑制率;2.根据CCK-8实验组数据,选取48h MET半抑制浓度10mmol/L,ADM半抑制浓度0.05mg/L及二者联合作用于CAL27细胞后,用流式细胞术检测各实验组细胞凋亡的情况;3.采用q RT-PCR技术检测MET 10mmol/L,ADM 0.05mg/L及MET 10mmol/L+ADM 0.05mg/L联合应用48h后舌癌CAL27细胞的相关凋亡基因Bax及Bcl-2 m RNA相对表达的情况。结果:1.CCK-8数据显示MET与ADM单独作用24h、48h、72h后,均对舌癌CAL27细胞的增殖产生抑制作用,并且在一定浓度范围内呈剂量与时间的依赖性,二者联合应用时比单独用药对CAL27细胞的增殖抑制作用更加明显。2.流式细胞术结果显示经MET 10mmol/L+ADM 0.05mg/L联合用药后比单独药物组更能促进细胞的凋亡。3.q RT-PCR显示MET及ADM二者合用时舌癌CAL27细胞的抗细胞凋亡基因Bcl-2的相对表达水平与单独用药组相比下调趋势更明显,而促细胞凋亡基因Bax m RNA的相对表达与单独用药组相比上调趋势更明显。结论:二甲双胍作为降血糖药物与阿霉素作用相似,单独使用时具有对舌癌CAL27细胞体外增殖的抑制作用。当二者联合应用时,对舌癌CAL27细胞的增殖抑制及促进凋亡的效果比单独用药更为显著。
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