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目的子痫前期(preeclampsia)是严重威胁母儿健康的妊娠期特有疾病,是导致孕产妇和围产儿死亡的主要原因之一。由于其发病机制至今尚不明确,严重影响了有效防治。近几年来由于分子免疫学的飞速发展,子痫前期被认为与炎症、血管内皮功能障碍,母胎间的免疫不耐受密切相关,从而引起免疫损伤、滋养细胞缺血及胎盘植入异常,引起全身不同程度的血管内皮损伤和严重的全身性炎症反应,弥漫性内皮细胞损伤被认为是子痫前期发病的中心环节。自然杀伤细胞(natural-killer ce11,NK)不依赖于抗原刺激,能自发地溶解多种肿瘤细胞和被病毒感染细胞,称为自然杀伤细胞,主要存在于外周血和脾脏中,在人外周血中占淋巴细胞的5%-15%,是机体重要的免疫细胞。人类NK细胞组的分化抗原有CD16,CD56,CD57,CD69,CD94,CD96等,其中具有代表性的表型为CD3-CD56+CD16+。本试验将应用流式细胞分析技术,检测晚孕子痫前期妇女外周血NK细胞CD3-CD16+CD56+变化,并与同期正常晚期妊娠妇女,健康育龄未孕妇女为对照。初步探讨NK细胞在子痫前期发病中的变化,以期探讨子痫前期的发病机制,从而为寻找防治措施提供新的思路。方法一、标本来源选取2010年1月至2010年3月在盛京医院产科住院的孕妇为研究对象。子痫前期患者27例,年龄26.3±1.8岁,孕周为36.2±1.5周,其中轻度子痫前期者8例,重度子痫前期者19例。子痫前期的诊断标准依据乐杰主编全国统编本科教材《妇产科学》第七版的诊断及分类标准。正常晚孕妇女15例为对照组,年龄28.3±1.5岁,孕周为36.4±1.3周。同时选择健康育龄未孕妇女15例作为对照组,年龄为24.9±1.6岁。以上两组妊娠组均为单胎妊娠,既往无特殊疾病史,无其他妊娠合并症,未服用免疫抑制或增强药物,组间一般情况比较无差异性。二、流式法检测NK细胞各组妇女空腹采取肘静脉血3m1,每份标本设两个试管,实验管及阴性对照管。每份标本各取50μl抗凝全血分别加入2个试管中,依次在实验管中加入抗CD3-FITC/CD16CD56-PE 15μl。加样完毕后,震荡混匀,避光静置15分钟。加入溶血剂450μl,震荡混匀,避光静置15分钟。各试管中依次加入1mlPBS,放入自动平衡离心机中,15℃转速设定1500转／分钟,离心5分钟。待离心完毕,快速倾倒上清,并且管口朝下,用卫生纸将管口的残留液体吸干,仅保留管底的沉淀物。各试管中依次加入溶血素400μl,吹打重悬,上机检测。结果子痫前期组母血CD3-CD16+CD56+NK细胞所占比例为15.51%±2.49%,明显高于正常晚孕组9.97%±1.41%和健康育龄未孕组11.11%±1.48%,有显著性差异(P均<0.01)。正常晚孕组母血CD3-CD16+CD56+NK细胞百分比低于健康育龄未孕组,但差异无统计学意义(p>0.05)。结论子痫前期时,外周血CD3-CD16+CD56+NK细胞水平升高,提示子痫前期时母胎界面免疫反应激活,出现免疫平衡失调,提示NK细胞可能参与子痫前期病理生理过程。