论文部分内容阅读
本文研究了某些有机小分子茜素红,二溴邻甲酚磺酞及中药成份秦皮甲素、秦皮乙素与蛋白质的相互作用机理,发现有机小分子与蛋白质的结合符合Langmuir 吸附聚集反应方程,其荧光猝灭为单一的静态猝灭过程。同时利用荧光法的高灵敏性,不经分离直接测定了中药秦皮中秦皮甲素的含量,共存物秦皮乙素不干扰测定,其具体内容如下: 第一章综述了荧光法研究有机小分子与蛋白质的作用机理,以及能量转移效率E、临界能量转移距离R0、给体-受体间距离r、结合常数K、结合位点数n 等常数的求法。第二章应用紫外光度法在pH = 4.3 的BR 缓冲体系中,用微相吸附—光谱修正技术研究了茜素红(ARS)与牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)的结合反应。其吸附结合常数分别为:K BSA-ARS = 3.950×10 4,K HSA-ARS = 4.377×10 4 。染料与蛋白的最大结合数分别为NARS∶BSA = 9∶1,N ARS∶HA S = 7∶1。经光谱修正技术计算结合产物的实际摩尔吸光系数分别为εBSA-ARS (537 nm) = 2.517×10 4 L·mol -1·cm-1,εHSA-ARS (519 nm) = 2.051×10 4 L·mol -1·cm-1,检出限BSA 为19 mg·L-1;HSA 为23 mg·L-1。经探讨该结合反应机理符合Langmuir 吸附聚集反应方程。第三章应用荧光光谱法研究了水溶液体系中,二溴邻甲酚磺酞与牛血清白蛋(BSA)、人血清白蛋白(HSA)之间的相互作用。实验表明:二溴邻甲酚磺酞对血清白蛋白的荧光有较强的猝灭作用,其荧光猝灭主要为静态猝灭,从荧光猝灭结果求得不同温度下染料与BSA 的结合常数K,发现随反应温度上升K 值下降。由反应焓变、熵变,确定二溴邻甲酚磺酞与血清白蛋白的结合主要是静电引力。依据非辐射能量转移机理,探讨了不同温度下二溴邻甲酚磺酞与血清白蛋白相互结合时,其给体—受体间距离和能量转移效率。进一步证实了该类反应为单一静态猝灭过程,且阐明了其猝灭机理是通过能量转移产生的。第四章用荧光光谱法研究了中药有效成份秦皮甲素、秦皮乙素与牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)之间的相互作用。结果表明:秦皮甲素、秦皮乙素对血清白蛋白的荧光有较强的猝灭作用,其荧光猝灭为单一的静态猝灭过程,其作用机制属能量转移机制。从荧光猝灭结果求得不同温度下反应的结合常数K,随反应温度上升K 值下降。由反应焓变、熵变,确定它们间的结合主要是静电引力。依据非辐射能量转