论文部分内容阅读
以海带为原料,研究了海带多糖的提取方法、纯化工艺和粗多糖的分级,确定了两种海带多糖的分子量并对其结构进行了初步研究。确定了硫酸-苯酚法测定多糖的工艺条件:吸收波长为487nm,多糖溶液为1ml,苯酚为1.2ml,硫酸为6ml,用蒸馏水定容至10ml,不需要水浴加热。根据单因素实验和L9（33）正交实验,确定了提取工艺条件:pH值为2、温度为65℃、液固比为40:1、提取时间为3h、提取次数2次,该条件下粗多糖的提取率为8.094%,并用浸提理论解释了海带多糖浸出速率的变化趋势。比较了Sevag法、三氯乙酸法、木瓜蛋白酶法对蛋白的脱色效果,结果表明木瓜蛋白酶法可有效脱除蛋白,该方法的工艺条件为:酶底比1.2%、pH值5.0,体系在70℃水浴中水解1.5h,蛋白的去除率为66.67%。实验发现木瓜蛋白酶脱蛋白的条件与多糖的提取条件相似,按照以上确定的方法在热水提取海带多糖的工艺条件下提取1.5h,再加木瓜蛋白酶提取1.5h,粗多糖的提取率达到13.17%,蛋白去除率为65.5%。活性炭、DA201树脂、DA202树脂和DA203树脂脱色结果表明: DA202树脂用量最小,色素去除率最高,多糖的损失率最低。DEAEC-52纤维素离子交换柱分级纯化粗多糖得到三种多糖L1、L2和L3,其中L2和L3含量高,为海带多糖的主要成分。将此两种多糖进行DEAE-SephadexA-75凝胶柱层析、紫外检测和冻融分析,证明了L2和L3为单一多糖。DEAE-SephadexA-200凝胶柱层析得到L2和L3的分子量分别为131.8kD和93.3kD。红外光谱分析表明:L2含有α、β两种糖苷键,是带有硫酸根的酸性多糖,L3是一种黏度很大的酸性多糖。