芪黄颗粒对动脉粥样硬化大鼠CRP、TNF-α表达的影响

来源 :陕西中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:linyasa
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目的:本研究通过建立动脉粥样硬化模型大鼠,观察芪黄颗粒对动脉粥样硬化大鼠血清中CRP、TNF-α水平的影响及主动脉的病理形态学改变的干预情况,探索芪黄颗粒干预抗动脉粥样硬化的作用机制,为芪黄颗粒对动脉粥样硬化的临床防治提供实验室依据。  方法:1.造模及分组:选用清洁级雄性SD大鼠50只,体重(200±20)g,普通饲料饲养,自由饮水,适应性喂养1w未发现异常后,逐只进行称重、编号后进入造模阶段,将50只大鼠随机分为空白组、模型组、芪黄颗粒低剂量组、芪黄颗粒高剂量组、辛伐他汀组5组,每组10只。整个实验过程中,每组均自由饮水,除空白组给予普通饲料喂养外,其余各组(模型组、芪黄颗粒低剂量组、芪黄颗粒高剂量组、辛伐他汀组)均给予高脂饲料喂养加维生素D3腹腔注射,在造模前注射60万IU/kg,造模后第3、6、9周各补充10万IU/kg的VitD3。2.给药:造模1w后开始灌胃,给药容积按10ml/kg计算,每日1次,连续灌胃8周。每周测体重1次以调整药物剂量和灌胃量。空白组:普通饮食喂养,按10ml/kg体重给予生理盐水灌胃,每日1次,至实验结束,自由饮水。模型组:高脂饲料喂养,在造模前腹腔注射60万IU/kg,造模后第3、6、9周各补充10万IU/kg的VitD3,按10ml/kg体重生理盐水灌胃,每日1次,至实验结束,自由饮水。芪黄颗粒低剂量组:高脂饲料喂养,在造模前腹腔注射60万IU/kg,造模后第3、6、9周各补充10万IU/kg的VitD3,给予芪黄颗粒2g/kg体重灌胃,每日1次,至实验结束,自由饮水。芪黄颗粒高剂量组:高脂饲料喂养,在造模前腹腔注射60万IU/kg,造模后第3、6、9周各补充10万IU/kg的VitD3,给予芪黄颗粒4g/kg体重灌胃,每日1次,至实验结束,自由饮水。辛伐他汀组:高脂饲料喂养,在造模前腹腔注射60万IU/kg,造模后第3、6、9周各补充10万IU/kg的VitD3,给予辛伐他汀2mg/kg体重灌胃,每日1次,至实验结束,自由饮水。3.指标测定及方法:所有大鼠连续灌胃8周后,于最后一次给药后禁食12小时,用10%水合氯醛麻醉大鼠,用采血针采血5ml,离心后取上清液, ELISA检测血清中CRP、TNF-?水平。然后游离胸腹主动脉全长,截取从主动脉弓至腹主动脉3~5cm,立即用生理盐水冲洗后,剥离多余的脂肪组织及结缔组织,标记编号,放入4%多聚甲醛溶液中固定24小时后,全自动组织脱水机脱水,常规石蜡包埋,切片,HE染色,观察主动脉内膜斑块形成、形态学改变情况,分析染色结果。  结果:  1.ELISA检测CRP、TNF-α水平:与空白组对照组比较,模型组、芪黄颗粒高剂量组、芪黄颗粒低剂量组及辛伐他汀组血清CRP、TNF-α浓度显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,芪黄颗粒高剂量组、芪黄颗粒低剂量组和辛伐他汀组血清CRP浓度显著下降,差异有统计学意义(P<0.05);与芪黄颗粒低剂量组比较,芪黄颗粒高剂量组、辛伐他汀组血清CRP、TNF-α浓度水平明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);芪黄颗粒高剂量组与辛伐他汀组两组血清CRP、TNF-α浓度水平虽都有所下降,但无明显差异(P>0.05)。  2.主动脉病理变化HE染色:空白组:可见血管内膜光滑平整无损伤,无炎性细胞,无脂质、泡沫细胞、平滑肌细胞、巨噬细胞、纤维组织增生及粥样斑块形成。模型组:可见大量脂质条纹或斑点,突出于内膜表面,排列杂乱无章,病灶处见大量泡沫细胞,大量平滑肌细胞增生、巨噬细胞及炎症细胞浸润,粥样斑块形成。芪黄颗粒低剂量组:可见较少的脂质条纹或斑点,突出于内膜表面,病灶处见泡沫细胞,平滑肌细胞增生、巨噬细胞及炎症细胞浸润,粥样斑块形成。芪黄颗粒高剂量组:可见少量脂质条纹或斑点,病灶处见泡沫细胞,平滑肌细胞增生、巨噬细胞及少量炎症细胞浸润,粥样斑块形成。辛伐他汀组:可见少量脂质条纹或斑点,病灶处见泡沫细胞,平滑肌细胞增生、巨噬细胞及少量炎症细胞浸润,粥样斑块形成。  结论:芪黄颗粒可降低动脉硬化大鼠血清中炎性因子CRP、TNF-α水平干预动脉硬化的形成,提示芪黄颗粒可能通过抑制AS过程中的炎症反应而干预动脉粥样硬化,明显延缓了动脉粥样硬化的发生发展。
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