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旋毛虫病是由旋毛形线虫(Trichinella spiralis)引起的一种人兽共患寄生虫病,主要寄生于猪、野猪、鼠、熊等150多种动物及人体。人体主要因生食或半生食含有旋毛虫肌幼虫囊包的猪肉或其他动物肉类而感染。由于其病原传播的复杂性,以致该病发现一百多年来,不仅没有得到完全有效的控制,而且发生范围反而逐渐扩大。要迅速、有效地控制和预防旋毛虫病的流行,必须有快速准确的检测技术。本研究选用旋毛虫P53ES基因重组蛋白免疫小鼠制备McAb,为进一步研制旋毛虫病诊断试剂盒提供理想、必备的试验材料。以旋毛虫P53ES基因的重组蛋白免疫BALB/c鼠,取小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞SP2/0融合,经间接ELISA筛选和有限稀释法克隆,筛选分泌高滴度McAb杂交瘤细胞株,制备腹水。Southern Biotechnology Associates,Inc的SBA ClonotypingTMSystem/AP对单克隆抗体进行亚类鉴定;采用ELISA间接法测定杂交瘤细胞上清液和小鼠腹水效价;Western-blot检测单克隆抗体的特异性;测定杂交瘤细胞分泌抗体的稳定性;间接ELISA检测单克隆抗体与隐孢子虫、猪鞭虫、猪囊尾蚴囊液抗原、多头蚴囊液、日本血吸虫抗原是否存在交叉反应;间接免疫荧光方法检测单克隆抗体与肌幼虫的免疫学反应。结果表明:得到两株能稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2H5和3D2;试剂盒鉴定两株McAb均属IgM亚类,其轻链均为κ链;腹水效价分别为1:24000和1:12000;Western-blot证实两株McAb均能与约53ku处的ES抗原反应,出现特异性条带;杂交瘤细胞株连续传20代,细胞生长良好,效价稳定;所得单抗与隐孢子虫、猪鞭虫、猪囊尾蚴囊液抗原、多头蚴囊液、日本血吸虫抗原均无交叉反应;间接免疫荧光试验结果表明单克隆抗体与肌幼虫发生免疫学反应。本研究成功制备了两株抗旋毛虫P53ES重组蛋白的单克隆抗体,为旋毛虫病的研究和研制旋毛虫病诊断试剂盒奠定了基础。