目的：对经典藏成药“二十五味珊瑚丸”进行系统的急毒、长毒等安全性研究,形成规范的安全性评价模式；观察分析主要重金属元素和有毒成分乌头类生物碱在血中的浓度和主要组织器官的蓄积情况,为临床安全、合理用药提供科学依据。方法：1.急性毒性实验：以最大浓度(0.464g/m1)最大给药量(0.4ml/10g)对小鼠进行一次灌胃给药,连续观察14天,每天定时观察小鼠毒性反应及死亡情况。2.长期毒性试验：根据急性毒性试验结果制定大鼠高、中、低给药剂量组(0.333、0.667、1.333g(原生药)/kg)和比格犬给药剂量组(0.25、0.5、1(原生药)g/kg),连续经口给药90天,观察动物因连续用药而产生的毒性反应和严重程度,以及停药后的发展和恢复情况。3.相伴毒代动力学研究：取三个月长期毒性试验大鼠和比格犬的生物样本,采用LC/MS/MS测定血清及组织中乌头类生物碱的浓度,运用DAS2.1.1程序计算毒代动力学参数。4.铜、汞、铅体内分布研究：取三个月长期毒性试验大鼠和比格犬组织器官,微波消解仪进行消解,原子吸收仪测定铜、汞、铅含量。结果：1.急性毒性实验：小鼠在刚灌胃后出现静伏不动,眼睑下垂,呼吸深快,竖毛等症状。4h之后上述症状逐渐恢复。连续观察14天,动物的外观、行为活动、精神状态、大小便及其颜色、被毛、肤色等均未见明显异常,试验前后小鼠体重呈正常增长状态,未见动物死亡。试验结束时肉眼解剖未见明显病理改变。最大给药量为18.56(原生药)g/kg。2.长期毒性试验：以二十五味珊瑚丸0.33、0.67、1.33g(原生药)/kg,分别相当于临床每日推荐剂量的20、40、80倍,给大鼠灌胃给药；以二十五味珊瑚丸0.25、0.5、1g(原生药)/kg,分别相当于临床每日推荐剂量的15、30、60倍,给比格犬灌胃给药,未见二十五味珊瑚丸引起各剂量组大鼠和比格犬一般体征、外观、行为、粪便、进食量、体重以及血液细胞学、血液生化学、主要脏器重量和组织病理学明显变化。大鼠停药后2周和4周,比格犬停药后35天观察,亦未见二十五味珊瑚丸引起上述指标的明显变化。3.相伴毒代动力学及组织分布研究：内源性杂质不干扰乌头类生物碱的测定,且未出现明显的基质效应；线性范围为0.1～200ng/ml(r=0.997),回收率大于60%,最低检测限为0.1ng/ml,精密度及准确度均符合生物样本测定要求。4.铜、汞、铅体内分布研究：二十五味珊瑚丸三个月大鼠长期毒性试验,高剂量组肾脏、肝脏汞含量明显高于对照组(p<0.01,p<0.05),心脏中铅含量高于对照组(p<0.05)二十五味珊瑚丸三个月比格犬长期毒性试验,高剂量组肾脏、肝脏、脑中汞含量明显高于对照组(p<0.01,p<0.01,p<0.05),脑中铅含量高于对照组(p<0.01)；停药恢复35天后,高剂量组脑中汞高于对照组(p<0.05)。结论：1.安全性评价：二十五味珊瑚丸小鼠急性毒性实验,从所试剂量以及给药后毒性表现判断,本品属无明显毒性药物；大鼠和比格犬长期毒性试验未见二十五味珊瑚丸有明显毒性作用,长期大剂量使用可致涎腺分泌增加和流涎,提示可能对植物神经系统有一定影响。2.相伴毒代动力学及组织分布研究：LC/MS/MS测定大鼠和比格犬血清及组织中乌头类生物碱含量准确,获得的毒代动力学参数和组织分布数据,可为临床安全、合理服用二十五味珊瑚丸提供科学依据。3.铜、汞、铅体内分布研究：二十五味珊瑚丸三个月大鼠长期毒性试验,汞在高剂量组肾脏和肝脏可能有一定蓄积性,铅在高剂量组心脏可能有一定蓄积性；二十五味珊瑚丸三个月比格犬长期毒性试验,汞在高剂量组肾脏、肝脏、脑中可能有一定蓄积性,铅在高剂量组脑中有一定蓄积性；停药恢复35天后,汞在高剂量组脑中仍有蓄积。