堇菜属（Viola）是一类早春植物,是堇菜科植物中种类多、分布广、变异大的类群。是一个世界性分布的大属,约有500多种,我国产110余种,多分布于东北、华北、长江流域以南各省,其中东北约40余种,辽东地区有30余种。堇菜属植物中许多种都具有典型的二态混合交配系统,即在同一个个体的不同时期或同一时期出现两种形态完全不同的花—开放花（chasmogamous,简称CH）与闭锁花（cleistogamous,简称CL）,是研究植物混合繁育系统的良好材料。本文用东北地区常见的16种堇菜属植物为研究对象,通过观察其中具有闭锁花的种类,与植物志中堇菜属的分组进行对比,观察其是否在同一分组,并对其进行分子鉴定,分析具有闭锁花的种类与无闭锁花的种类之间的亲缘关系,以帮助我们更好地理解植物的二态混合交配系统在其进化过程中与物种分化的关联性。实验结果如下:1.本实验采集到的16种堇菜属植物中,有闭锁花的种类6种,均属于堇菜科堇菜属分类下的堇菜亚属,但并不属于同一分组,其中紫花地丁、东北堇菜、早开堇菜和白花堇菜属于合生托叶组;如意草属于双缘柱头堇菜组;鸡腿堇菜属于鸟嘴柱头组,很有可能堇菜属植物的二态混合交配系统和亲缘关系间存在一定的相关性,并且后期由于种种外部原因如生存环境恶劣,传粉困难等对于其交配系统在物种分化时产生了一定影响,导致更多的堇菜属植物种类为了更高效率的遗传而做出自然选择,进化出了闭锁花用于自交以保证后代的延续。2.观察发现紫花地丁、鸡腿堇菜、如意草闭锁花数量较多,早开堇菜闭锁花数量较少,并且闭锁花数量多的种（如鸡腿堇菜）生长密度较高,经常有成簇生长的情况,且种群个体间差异性较小;闭锁花较少的种（如早开堇菜）生长密度较低,每个个体单独生长,且种群个体间差异性较大。造成这种情况的原因可能是,在CL花、CH花所结的种子成熟时期,蒴果裂开所产生的力会将种子弹射出去,而CL花的种子没有CH花种子的高度高,所以CL花的种子会散落在植株附近,而CH花的种子会弹出较远的距离,因此CH花产生的种子会削弱同物种间的姊妹竞争,产生的后代可能会有比较丰富的遗传多样性,这可能是这种特殊的繁育系统对于种群遗传结构所产生的影响。3.根据聚类分析结果显示,11种堇菜属植物可以分为5组,其中斑叶堇菜、白花堇菜、凤凰堇菜分别为一组,紫花地丁、东北堇菜、早开堇菜聚为一组,大叶堇菜、如意草、东方堇菜、鸡腿堇菜和球果堇菜聚为一组,从遗传距离上看,东方堇菜与其他种类距离最远,而在《中国植物志》分组中,东方堇菜为须毛柱头堇菜亚属中的直立黄花堇菜组,其余10种均属于堇菜亚属,两组分类结果基本一致;而其中6种具有闭锁花的堇菜属植物中,紫花地丁、东北堇菜、早开堇聚为一组,而其他三种白花堇菜、如意草和鸡腿堇菜都不在同一分组,这与堇菜属植物生态学观察结果相一致。堇菜属植物到如今已经进行了几十次的进化,很有可能说明堇菜属植物的物种分化过程是在二态混合交配系统出现之前发生的,其中有一部分种的交配系统和物种分化是相伴产生的,而这种特殊的交配系统在后期对于种群遗传结构有一定的影响,在后期物种演化的过程中,其他种类的堇菜属植物受到外部环境等因素的影响,为了保证稳定的遗传及后代的延续,进而也演化出了这种特殊的繁育系统,但是对于物种的种类分化没有太大影响。