IGF-1和EGF低温保存液对大鼠触须毛囊活性的影响

来源 :南华大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:naomi
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目的:探讨IGF-1和EGF低温保存液对大鼠触须毛囊活性的影响。方法:选取10只SD大鼠,要求为6-8周的雄性鼠,麻醉后进行断颈处死,后进行三次消毒,消毒试剂为75%的酒精。每次消毒时间控制为10秒,完成消毒操作后将大鼠移入超净工作台。取其触须毛囊上段180个,其中120个随机分成四组,每组30个,分别放入NS组(A组)、NS+IGF-1组(B组)、NS+EGF组(C组)和NS+IGF-1+EGF组(D组)保存液中,各组依次保存3小时、6小时、12小时。通过苏木精伊红(Hatmatoxylin Eosin,HE)染色确定毛囊组织结构,碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,ALP)试剂盒检测毛囊活性。将另外60个(取自上述180个中的经过体外保存3、6、12小时后)触须毛囊上段组织移植到裸鼠背部,1天后处死裸鼠取材,再次观察毛囊组织结构,以及其ALP活性。结果:大鼠的触须毛囊大体形态结果显示,触须皮下毛囊较大,毛囊上段提取方便,切除方法效果较好;毛囊上段组织质地虽略有软化,但内部结构依然完整。毛囊体外培养检测结果显示:(1)A组、B组、C组和D组分别保存3、6、12小时时的ALP活性组间差异,以及D组在3、6、12小时时的ALP活性差异性分析结果均具有统计学意义(P值均<0.05);(2)A组3、6、12小时的ALP值均显著低于C组和D组(P值均<0.05),A组3和6小时的ALP值显著低于B组(P值均<0.05);D组12小时ALP活性显著低于3小时和6小时组(P值均<0.05),其余各组之间的ALP活性差异无统计学意义(P值均>0.05);(3)各组毛囊上段组织体外保存随着时间的延长,毛囊组织结构发生退行性变化越明显。毛囊体内移植检测结果显示:(1)毛囊上段组织在体外对其进行保存,时间达到3小时后,移植至裸鼠体内,对其ALP进行活性测定,显示组间差异具有统计学意义(F为9.07,P为0.01)。同时对四组保存液之间进行两两比较,结果显示,A、B两组活性明显低于C和D;(2)经D组保存液体外保存不同时间后移植至裸鼠体内的ALP活性组间差异具有统计学意义(P为0.00),3小时组ALP活性显著高于6小时和12小时组(P值均为0.00);(3)将毛囊上段组织移植到裸鼠皮下后虽然未能够成功诱导和重建完整的毛囊结构,但可见毛囊上段组织已被裸鼠皮下粘膜组织覆盖,且可形成血供关系。各组随着毛囊在体外保存时间的延长,其毛囊结构发生退行性变化越明显。结论:低温联合IGF-1和EGF保存液可显著提高毛囊上段组织体外和体内的活性。
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