【摘 要】
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目的:探究SMAD4对胃癌细胞迁移的影响,以及可能存在的机制,为胃癌靶向治疗提供一条新的线索。方法:本实验从the human protein atlas数据库中搜索SMAD4在胃癌组织和正常胃黏膜组织的免疫组织化学染色图进行比较验证,采用QRT-PCR技术检测正常胃组织细胞GES-1及BGC-823、MGC-803、AGS三种胃癌细胞系中SMAD4m RNA的表达量。采用q RT-PCR技术和W
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目的:探究SMAD4对胃癌细胞迁移的影响,以及可能存在的机制,为胃癌靶向治疗提供一条新的线索。方法:本实验从the human protein atlas数据库中搜索SMAD4在胃癌组织和正常胃黏膜组织的免疫组织化学染色图进行比较验证,采用QRT-PCR技术检测正常胃组织细胞GES-1及BGC-823、MGC-803、AGS三种胃癌细胞系中SMAD4m RNA的表达量。采用q RT-PCR技术和Western blot技术验证SMAD4敲低和过表达效率。采用细胞划痕技术观察AGS细胞株和MGC-803细胞株的SMAD4过表达组和对照组细胞迁移能力变化。免疫共沉淀实验验证AGS细胞株和MGC-803细胞株中SMAD4与MEK之间存在蛋白互作关系。Western blot技术检测AGS细胞株和MGC-803细胞株的SMAD4敲低组和对照组ERK、MEK、p MEK、p ERK蛋白表达的变化。结果:（1）从the human protein atlas数据库中的SMAD4免疫组化染色图和我们进行的QRT-PCR实验的结果均表明,与正常人胃黏膜细胞相比,在胃癌细胞中SMAD4的m RNA表达量均下降。统计学上差异具有统计学意义（p＜0.0001）。（2）细胞划痕实验的结果显示,与未转染的胃癌细胞组相比,SMAD4过表达的胃癌细胞组在48h内的伤口愈合率明显降低,统计学上两者之间的差异具有显著性意义（p＜0.01）。（3）免疫共沉淀实验表明,SMAD4蛋白和MEK蛋白具有相关性。Western blot技术检测结果表明,与未转染的胃癌细胞组相比,SMAD4的降低可以导致胃癌细胞中ERK的磷酸化增多,其上游蛋白MEK的磷酸化降低,统计学上两组差异具有显著性意义（p＜0.05）。结论:1.SMAD4在胃癌中呈低表达。2.SMAD4可以抑制胃癌细胞的迁移。3.在胃癌发展中,SMAD4的降低可以激活ERK信号。
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