【摘 要】
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NDRG2(N-myc down-stream regulated gene 2)是我们在1999年发现的一个NDRG基因家族的新成员。NDRG家族序列在进化中高度保守,成员之间高度同源,提示该基因家族具有重要的生
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NDRG2(N-myc down-stream regulated gene 2)是我们在1999年发现的一个NDRG基因家族的新成员。NDRG家族序列在进化中高度保守,成员之间高度同源,提示该基因家族具有重要的生物学功能。生物信息学分析未发现NDRG2及其家族其它成员具有任何已知的结构域或基序。目前关于NDRG2的具体功能尚不清楚。但初步的研究已经表明NDRG2在抑制肿瘤生长,参与应激反应等生命活动中有一定作用。如能找到与之相互作用的蛋白分子,会对其功能研究提供有用的线索。研究相互作用蛋白的方法有多种,应用最广泛的是酵母双杂交,尤其是对功能未知的蛋白。为深入探讨NDRG2的功能,我们以Ndrg2为诱饵用酵母双杂交方法筛选了成人脑cDNA文库,获得了12个阳性克隆,分别代表5种基因。筛选获得的5种基因片段包括①与分化相关的FHOS(forming homologue overexpression spleen)分子片段。②与肿瘤的非锚着依赖生长恶性表型关系密切的MSP58(58-KDa microspherule protein)基因片段,该分子另有两个亚型-MCRS1(Microspherule protein 1)和MCRS2(Microspherule protein 2),我们所筛到的片段为三个分子C末端共同序列。将其命名为MCRS2-C。③一个编码假想蛋白的基因片段。④一个随机的cDNA克隆。⑤编码Syntaxin 1A蛋白的mRNA3’端的一段非编码序列。 我们对酵母双杂交筛选到的阳性分子MCRS2-C与Ndrg2的相互作用进行了深入的研究。应用GST-Pulldown及免疫共沉淀方法在体外及细胞内验证了MCRS2-C与Ndrg2的物理相互作用。进一步构建了Ndrg2与红色
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