IFN-β基因修饰的人骨髓间充质干细胞抗前列腺癌细胞系PC-3效应的实验研究

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目的:观察人类β干扰素(IFN-β)基因转染的人骨髓间充质干细胞(hMSCs)对前列腺癌细胞PC-3体外生长情况的影响,初步探讨人骨髓间充质干细胞作为基因运载细胞治疗前列腺癌的可行性。方法:构建人类β干扰素基因的真核表达质粒pCDNA3.1-IFN-β,通过脂质体介导,体外转染人骨髓间充质干细胞。将成功表达β干扰素的IFN-β-hMSCs与前列腺癌细胞系PC-3在Transwell培养体系中体外共培养,分别于共培养后第1天、第3天、第5天对前列腺癌细胞株PC-3进行胎盼蓝染色,计数存活细胞数目,流式细胞仪分析PC-3凋亡情况。同时保留部分细胞上清,ELISA法分析IFN-β的表达情况。结果:经IFN-β基因修饰的hMSCs在体外实验中能有效地抑制前列腺癌细胞生长,促进其凋亡。共培养后第5天,IFN-β-hMSCs与PC-3共培养组的存活PC-3数量由共培养前的0.5×106减少到(0.42±0.032)×106,而各对照组(PC-3单独培养组、浓度为1000IU/ml人工重组IFN-β作用下的PC-3单独培养组、hMSCs与PC-3共培养组、P-hMSCs与PC-3共培养组)前列腺癌细胞数量均有不同程度的增长,实验组与各对照组之间比较差异存在统计学意义(P<0.001)。流式细胞仪分析前列腺癌细胞的凋亡率为40.29%。ELISA分析细胞上清:在转染后4小时,IFN-β-hMSCs即可分泌表达出IFN-β,24小时到高峰(3~4×103IU/105个细胞),72小时后表达量有所下降。对照组中未能检测出IFN-β的表达。结论:经β干扰素基因修饰的hMSCs能成功分泌表达出β干扰素,并且在体外实验可以有效抑制前列腺癌细胞生长,促进其凋亡。研究结果可能为前列腺癌的基因靶向治疗提供新的研究方法。
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