ICAM-1含量变化与兔角膜新生血管化及移植排斥反应的实验研究

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目的:检测角膜新生血管化(Corneal neovascularization,CNV)及急性排斥反应兔角膜细胞间粘附分子-1(Intercellular adhesion Molecule-1,ICAM-1)的分布与表达。检测可溶性细胞间粘附分子-1(Soluble intercellular adhesion Molecule-1 ,sICAM-1)在急性排斥反应中含量的动态变化,探讨高危角膜移植术后ICAM-1含量变化与排斥反应的关系,寻找一种预测排斥反应的新方法。方法:健康新西兰白兔20只右眼用角膜缝线法制作角膜新生血管化(Corneal neovascularization,CNV)模型后,制作穿透性角膜移植模型(Penetrating keratoplasty )4组,A组:正常对照组4只;B组:自体穿透性角膜移植组8只;C组:同种异体穿透性角膜移植组8只; D组:新生血管化角膜穿透性移植组8只,术后角膜新生血管(Corneal neovascularization, CNV)生长情况进行评分;记录植片存活时间;比较各组移植排斥指数(Rejection index,RI),包括角膜植片透明度、水肿、和新生血管程度;术后第3、第7、第14、第21、第28天采取耳缘动脉血(约0.8ml),取血清,保存。排斥反应发生前(约术后第10天) B、C、D组各取4只兔子,A组取2只兔子,抽取房水后,取角膜保存。应用酶联免疫吸附(ELISA)双抗体夹心法检测房水及外周血中sICAM-1的含量,角膜组织行HE、ICAM-1免疫组织化学染色观察。结果:CNV生长达中央平均为16.4±1.8d;排斥组植片平均存活12.4±1.3d,其他组角膜植片长期存活;正常房水和血清中均可检测到少量的sICAM-1,它们的浓度分别为16.55±3.63 ng·L-1, 95.15±6.26 ng·L-1;术后早期D组房水及外周血中sICAM-1含量即升高,至排斥反应前达最高水平分别为53.87±19.23 ng·L-1, 378.78±30.58 ng·L-1,在观察期内维持高水平;血清和房水中的含量变化密切相关(r=0.999,P<0.05)。排斥反应发生时,炎性细胞布满全层,基质结构紊乱,有大量新生血管,部分内皮消失,ICAM-1在角膜新生血管内皮细胞中表达增强,在部分单核细胞、淋巴细胞浸润部位表达较B、C组明显增强。结论:ICAM-1在角膜移植免疫排斥反应中发挥重要作用,术后监测sICAM-1浓度变化对排斥反应的发生有一定预测和早期诊断作用。
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