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生脉散也叫生脉饮,是我国中医著名古方之一,最早出自金代医家张元素著作的《医学启源》医书中。生脉散在临床上主要用于冠心病、心力衰竭、急性心肌梗死等心脑血管疾病的治疗,但对其增强免疫功能和抗肿瘤辅助治疗方面的研究却不多。本文以无水乙醇为溶剂,采用回流提取的方法制备生脉散醇提物,确定总皂苷为生脉散醇提物的标志性成分并测定其含量。初步评价生脉散醇提物的毒性,并按照《保健食品检验与评价技术规范2003版》中关于增强免疫力的研究方法,以健康的雌性昆明种小鼠作为实验对象,分别以生药量为1、2、6g/kg三个剂量组的生脉散醇提物和对照组(蒸馏水)、胸腺肽组(10mg/kg)灌胃给药,每天一次,连续30天。分别测定脏器/体重比值、细胞免疫功能、体液免疫功能、单核-巨噬细胞功能和NK细胞活性,对生脉散醇提物的免疫活性进行全面的研究。以ras基因突变的非小细胞肺癌(NSCLC)细胞为实验对象,采用MTT比色法评价生脉散醇提物抑制NSCLC细胞ras过度激活的活性,得到以下的结论:1、生脉散醇提物的制备工艺确定为用无水乙醇回流提取2次,每次2h,第一次和第二次分别加10倍体积和8倍体积的无水乙醇。2、确定总皂苷作为生脉散醇提物的标志性成分,用紫外-可见分光光度法测定,生脉散醇提物的总皂苷含量为2.69g/100g。3、生脉散醇提物的急性毒性实验结果表明,生脉散醇提物的最大溶解浓度为371mg/mL,给小鼠灌胃生脉散醇提物的最大耐受量为7.42g/kg。4、与对照组相比,生脉散醇提物能够显著促进刀豆蛋白A(ConA)诱导的小鼠脾淋巴细胞的增殖转化作用、促进迟发性变态反应(DTH)作用和增强单核-巨噬细胞的碳廓清作用,但对其余检测指标没有明显作用,提示生脉散醇提物具有增强免疫力的功能。5、采用MTT比色法研究生脉散醇提物对ras基因突变的NSCLC细胞的抑制作用,发现生脉散醇提物作用48h对NSCLC细胞H358、H1299和A549的IC50分别为249mg/mL、82mg/mL和130mg/mL,敏感程度依次是H1299>A549>H358,且与用药剂量呈剂量依赖关系。提示生脉散醇提物对于NSCLC细胞具有普遍的生长抑制作用,但对突变型ras和野生型ras不具有选择性。