抗疏健骨颗粒对去势大鼠骨组织形态及BMP-2、MMP-9蛋白表达影响的实验研究

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目的:通过实验观察抗疏健骨颗粒对去势大鼠骨组织形态及BMP-2、MMP-9蛋白表达的影响,研究抗疏健骨颗粒对绝经后骨质疏松症的作用机理,为抗疏健骨颗粒用于临床治疗绝经后骨质疏松症提供实验依据。  方法:实验依照体重分层,每层依据随机分组的方法,将60只雌性大鼠分成五组,分别为假手术组、模型组、抗疏健骨颗粒大、中、小剂量组。采用大鼠绝经后骨质疏松症经典造模方式“摘除双侧卵巢”,制造绝经后骨质疏松症模型:将抗疏健骨颗粒大、中、小剂量组及空白对照组大鼠采用去势法造绝经后骨质疏松症模型。为排除手术因素影响,设立假手术组,通过在双侧卵巢位置附近取等大小脂肪组织一块儿方法造模。造模成功一周后,灌胃给药。抗疏健骨颗粒大剂量组给予2.86g/kg抗疏健骨颗粒、抗疏健骨颗粒中剂量组给予1.43g/kg抗疏健骨颗粒、抗疏健骨颗粒小剂量组给予0.71g/kg抗疏健骨颗粒,使用时加蒸馏水将抗疏健骨颗粒配制成不同药物浓度混悬液灌胃;假手术组和模型组分别给予2ml生理盐水灌胃。12周后取材。取右侧股骨上1/3段。取材后脱颈处死。HE染色法观察病理情况,免疫组化法观察BMP-2、MMP-9表达情况。结果用SPSS19.0软件分析。  结果:骨组织形态:空白模型组右股骨骨小梁变细、断裂,数量减少,排列疏松紊乱。抗疏健骨颗粒组比较空白组骨小梁变粗变密,骨的连续性好,排列尚规则,成网状结构。假手术组骨小梁分布均匀,骨连续性好。骨小梁厚度(Tb.Th)与平均骨体积分数(BV/TV):假手术组与空白组相比较,P<0.05有差异性。大、中、小剂量组同空白组相比较结果升高,P<0.05有差异性。抗疏健骨颗粒中剂量组与大、小剂量组比较,P<0.05有差异性。BMP-2:模型组BMP-2蛋白表达较假手术组降低(P<0.05)有统计学意义,抗疏健骨颗粒各治疗组BMP-2较模型组中含量升高(P<0.05)有统计学意义,各用药剂量治疗组之间比较,中剂量组BMP-2蛋白含量最高(P<0.05)有统计学意义;MMP-9蛋白含量:空白模型组MMP-9含量较假手术组升高(P<0.05)有统计学意义,抗疏健骨颗粒各治疗组MMP-9含量较模型组减低(P<0.05)有统计学意义,各用药剂量组之间比较,中剂量组MMP-9含量最低(P<0.05)有统计学意义。  结论:卵巢摘除后可形成绝经后骨质疏松症模型,绝经后骨质疏松症患者骨形态发生改变,且在骨组织中有BMP-2、MMP-9蛋白表达。绝经后骨质疏松症患者骨密度降低,骨小梁体积下降,骨组织中MMP-9蛋白表达呈升高趋势,BMP-2蛋白表达呈下降趋势。抗疏健骨颗粒有改善骨组织形态,上调BMP-2及降低MMP-9蛋白表达的作用,抗疏健骨颗粒中剂量组效果最好。
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