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随着现代饮食结构的改变和生活节奏的加快,血栓性疾病的发病率和死亡率逐年上升,与此同时发病人群的年龄有不断降低的趋势。外科手术、抗凝和药物溶栓是目前治疗血栓性疾病的主要方法,但临床应用最广泛、最有效的治疗手段仍是药物溶栓。因此研发新型溶栓药物是当前研究工作的重点。微生物种类繁多、繁殖速度快、培养方法较为简单,是纤溶酶的重要来源之一。本研究是从河北省内采集的土壤中利用纤维蛋白平板法分离筛选到41株产纤溶活性物质的菌株,之后用纤维蛋白平板法进行多次复筛,最终得到了产纤溶酶活性最高的6-1菌株。本文对6-1菌株进行下列研究:菌种的鉴定、液体发酵条件的优化、6-1菌株纤溶酶的提取、分离和纯化以及酶学性质研究。主要研究结果为:通过形态观察以及生理生化试验得出菌株6-1与芽孢杆菌属(Bacillus spp.)的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的特征比较接近,16S rDNA序列系统发育树同源性分析两者的同源性达到99.76 %,因此确定6-1菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis);对6-1菌株进行发酵条件优化,通过各单因素实验和正交实验分析,得出最佳培养基组成为:麦芽糖10 g/L、蛋白胨10 g/L、Na2HPO4 2.0 g/L、NaH2PO4 1.0 g/L、FeSO4·7H2O 0.5 g/L、CaCl2·2H2O 0.5g/L。发酵的最佳工艺条件是:培养基灭菌前的pH为7.0,接种量4 %,每250 mL三角瓶装液量50 mL,发酵温度37℃,摇床转速l80 r/min,发酵周期为48 h,此条件下产酶量最高可达647.11±11.19 U/mL,比优化前的402.55±5.17 U/mL提高了60.75%;对该菌株发酵的上清液进行硫酸铵盐沉淀和DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析,分离纯化得到一个电泳纯6-1-1纤溶酶组分,SDS-PAGE测定相对分子量为19.0KD。最后对6-1-1纤溶酶的酶学性质进行的研究表明:该酶最适作用温度37℃,最适pH 8.0,且具有广泛的温度适应性和酸碱适应性;Ca2+、Mg2+、Na+、K+等离子对该酶均具有激活作用,Cu2+、Fe3+则完全抑制其纤溶活性;EDTA、PMSF和DTT对该酶有抑制作用,表明该酶含有二硫键、金属和丝氨酸,属丝氨酸蛋白酶类。