人肝细胞肝癌与癌旁肝硬化组织中HSP70的表达及其与p53在肝细胞肝癌中成复合物的初步研究

来源 :第四军医大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liwenwu042
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该实验对80例肝癌及癌旁肝硬化组织进行了HSP70的免疫组化染色,结果显示HSP70在肝癌及癌旁肝硬化组织中均呈高表达.HSP70参与了肝癌的发生发展.HSP70与突变型p53蛋白相互结合形成p53-HSP70复合物在口腔癌及卵巢癌组织中已得到证实,并且该复合物可能参与了某些细胞的恶变并可作为判断肿瘤患者预后不良的一项指标.二者在肝癌组织中的关系未见报道.我们实验室在以往的研究中通过免疫组织化学、原位杂交及荧光抗体双标记结合激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)等方法发现在肝癌组织中不仅有HSP70及突变型p53的高表达,且二者的表达有一定的相关性,p53阳性者一定伴有HSP70的核阳性,二者共定位表达于细胞核中.该实验对临床收集到的肝癌组织标本制备石蜡切片,进行免疫组织化学染色,从中筛选出5例HSP70与p53均为阳性的组织,然后用两种不同的组织匀浆法分别提取组织总蛋白和核蛋白,用western blot和ELISA初步检测,进而利用免疫共沉淀法提取目的蛋白,最后以western blot检测之.该研究一方面从分子水平证实了p53-HSP70复合物可能是肝癌发生发展中HSP70调节p53功能的一种重要方式;另一方面,也提示肝癌中可能存在基于p53-HSP70复合物的肿瘤主动免疫机制,因此该复合物可以作为抗肝癌的特异性疫苗用于肝癌的特异性免疫基因治疗.可以预见,利用HSP70能与肿瘤来源的p53结合形成p53-HSP70复合物这一特性,通过从肿瘤组织中直接提取或者融合蛋白表达、体外重建等方法来制备特异性肿瘤疫苗,从而作为肝癌的免疫基因治疗有其现实可行性.
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