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目的：动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)是危害人类健康的主要疾病之一，对于AS发病机制的研究一直是心血管疾病研究的热点，以前被认为是一种单纯脂质蓄积病变，新近研究证明，在AS病变发生发展直至最终血栓形成的各个阶段，炎症活动起着根本作用，而大量细胞黏附分子介导着这一作用。血管内皮细胞(vascularendothelialcell，VEC)与白细胞间相互作用是这一炎症过程的始动因素，其在引发和扩大动脉炎症反应中起了关键性作用。在各种危险因素作用下内皮细胞受损、功能紊乱，分泌炎症介质或调解白细胞在其表面的黏附而具备潜在的炎症作用。研究内皮细胞受损情况及黏附分子的表达在防治AS具有非常重要的意义。本研究通过建立兔高脂模型，采用免疫组化的方法检测在早期AS形成中不同时间段血管内皮细胞黏附分子(vascularcellularadhesionmolecule-1,VCAM-1)和血小板内皮细胞黏附分子(plateletendothelialcelladhesionmolecule-1，PECAM-1)的动态表达，并应用原子力显微镜(atomicforcemicroscope，AFM)观察VEC膜的超微结构的动态演变，阐明VEC和黏附分子在AS形成中的作用。以及应用阿托伐他汀(atorvastatin)干预后的影响，来探讨他汀类药在抗AS中的非降脂作用的可能机制。
方法：新西兰纯种雄性大白兔88只，按清洁级动物分笼喂养，体重1.8-2.5Kg，适应性喂养一周后，随机分为3组，即正常对照组(C组)24只：喂以普通颗粒兔饲料;AS模型组(AS组)32只：喂以高脂饮食；atorvastatin组(D组)32只：高脂饮食喂养，同时予atorvastatin(4mg/kg.d)灌胃。分别于实验开始及第2、4、6、8周末5个时间点，记录兔体重。于实验开始随机抽取10只兔，空腹抽取耳沿静脉血行有关化验，并于实验的2、4、6、8周末随机处死兔6-8只，抽取下腔静脉血，测定血脂、转氨酶、磷酸肌酸激酶，同时取胸主动脉弓处血管制作石蜡切片，分别进行常规VCAM-1和PECAM-1免疫组化染色，并用图像分析；取胸主动脉中段标本平铺固定于载玻片上，应用AFM观察内皮细胞超微结构的变化。
结果：
1大体标本肉眼观:C组兔主动脉壁薄，有韧性，不易拉断，内膜呈透明色，无斑块形成。AS组随时间延长血管壁逐渐变厚，脆性增加，易拉断，内膜呈灰白色，明显斑块形成，第8周有粥样斑块溃疡糜烂改变。D组动脉壁较AS组薄，略厚于C组，可见较少局限性的斑块形成，但随时间延长逐渐好转，各期均明显好于同期AS组。
2C组血脂在实验前后无明显变化，而AS组和D组血浆血脂水平包括胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)在2、4、6、8周末时较实验前及C组均已明显升高；同期D组各项血脂水平均明显低于AS组(均P＜0.001)，高于C组(均P＜0.001)。
3实验前后及三组间血浆转氨酶、磷酸肌酸激酶水平无明显差别(P＞0.05)。
4在C组胸主动脉VCAM-1无表达，PECAM-1在血管内皮细胞间可见少量表达。AS组胸主动脉VCAM-1免疫反应呈阳性、PECAM-1免疫反应阳性范围及程度均高于C组。D组胸主动脉VCAM-1、PECAM-1免疫反应阳性范围及程度均低于同期AS组，至第8周几乎无表达。
5AFM下VEC的超微结构变化：(1)50μm大范围扫描：C组VEC呈梭形，排列规整，其长轴与血液流动方向一致；AS组随时间不同内皮细胞发生了动态改变，细胞形态变成球形、三角形、不规则形等多种形态、体积变大肿胀，排列不规则，极相紊乱。(2)1μm及500nm扫描可见：C组VEC膜蛋白由圆形、椭圆形等大小较一致的颗粒样隆起构成，隆起结构光滑、饱满，排列疏密均匀一致，各隆起间界限分明。AS组细胞膜蛋白由三角形、多角形、不规则形等大小不一的隆起组成，隆起结构起伏较大，排列疏密明显不均，隆起表面凹凸不平，各隆起间界限随时间推移逐渐变得模糊不清，偶见孔洞。8周末细胞膜多由不规则形大小相差极为悬殊的隆起组成；隆起间有许多孔洞。D组随时间推移VEC形态、排列及膜蛋白结构更接近C组。
6500nm水平下对VEC膜粗糙度分析：AS组随时间延长粗糙度逐渐增加，与C组和D组比较均有统计学差异(P＜0.01)。D组细胞膜粗糙度高于C组(P＜0.01)。
结论：
1AFM可以清楚直观地观察到AS时VEC的超微结构及三维成像情况。
2在AS形成中，VEC的超微结构随时间的推移表现出一个动态变化，提示VEC受损可能是AS发生发展中的关键环节。VEC膜粗糙度的改变可能更易于白细胞牢固地黏附于内皮细胞上，从而加速了AS的发生发展。
3VCAM-1和PECAM-1在胸主动脉的表达随AS病变加重而增强，其参与了AS的发生和发展。
4atorvastatin除了降脂外，还可通过抑制黏附分子VCAM-1和PECAM-1过度表达、保护改善VEC超微结构，从而发挥其抗AS作用。