团头鲂突变体鉴定、雌核发育、雌二醇诱导及卵泡抑素2对其生长作用的研究

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团头鲂(Megalobrama amblycephala)俗称武昌鱼,原产于我国长江中游一些湖泊中,是我国所特有的重要草食性经济养殖鱼类之一。经过多年选育,现已有团头鲂良种,然而选育无止境;为更好的满足日益扩大的市场需求,团头鲂良种的选育及研究至关重要,本研究分别通过对团头鲂突变体的鉴定研究、团头鲂的雌核发育、雌二醇诱导及FST2基因对生长影响的实验,为团头鲂的育种提供一定的资料依据。首先,本研究以自然环境下发现的5尾红色鳊鱼(雌鱼3尾,雄鱼2尾)为材料,对其进行了种质遗传鉴别。实验分别测量了这5尾鳊鱼7项可数性状、11项可量性状和20项框架,并与实验室所测6个鳊鲂鱼类群体形态框架做主成分分析,结果表明,这5尾红色鳊鱼在可量性状上单独聚类,且与团头鲂较近;研究发现这5尾红色鳊鱼与鲂属东江三角鲂、钱塘江三角鲂、广东鲂、厚颌鲂以及鳊属长春鳊的微卫星标记都不同,但与鲂属的团头鲂相似;最后,对这5尾红色鳊鱼的COX1和COX2基因进行测序,并与其它近缘物种进行聚类分析,发现这5尾突变体间与团头鲂的亲缘关系接近,属于团头鲂的自发体色突变体,红色团头鲂可为团头鲂的遗传学和育种学研究提供宝贵的研究材料。在雌核发育育种上,本研究分别利用遗传失活的红鲫鱼和鲫鱼精子,采用冷休克方法人工诱发团头鲂二倍体雌核发育。对激活后5min、10min、15min的团头鲂受精卵分别在0-4℃低温条件下进行染色体加倍处理10min、20min、30min,得出各组条件下的受精率、出苗率和成活率。在实验条件下,用红鲫鱼精子诱导的团头鲂雌核发育效果比鲫鱼精子的好。红鲫鱼精子诱导的团头鲂雌核发育最佳实验条件为受精后5min后0-4℃冷休克20min,平均存活率为12.5±3.6%;用鲫鱼精子诱导的团头鲂雌核发育最佳实验条件为受精10min后0-4℃冷休克20min,其次为受精后5min后0-4℃冷休克20min,其平均存活率为2.1±0.6%。实验较详细研究了团头鲂的雌核发育的条件,为之后团头鲂良种保存、育种奠定了一定的基础。本研究通过对出苗15天的相同大小规格团头鲂幼苗分别用浓度为0、10、30、100、200、300μg/L的雌二醇浸泡处理60天,然后在网箱中养殖,发现其存活率分别为73.3%、87.5%、40.0%、41.6%、52.5%、4.2%;在网箱养殖1个月后,测量各浓度雌二醇处理组的体长、体高和体重作为第一次测量数据,网箱养殖第2个月后,再次测量各组体长、体高和体重作为第二次测量数据,通过这2组数据,算出其体长、体高和体重的平均增长值,发现雌二醇处理的各组数值均比对照组小。其中,在100μg/L浓度的雌二醇处理条件下,体高增长比对照组小,差异性不显著;在10μg/L浓度处理条件下,体高增长比对照组小,差异性显著;而实验组其它各项平均值都比对照组小,且差异性极显著。实验说明了在实验浓度下的雌二醇处理对团头鲂幼苗的生长有显著的抑制作用。实验验通过对转FST2基因的团头鲂的研究,发现FST2基因转入团头鲂中的阳性个体很少,存活率很低,通过对存活阳性个体及对照组个体的体长、体高和体宽的测量,发现体高/体长和体宽/体长的比值均高于对照组,说明了FST2基因对肌肉增长有明显的促进作用。
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