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干旱等非生物逆境是影响植物生长发育的主要因素，脱落酸(ABA)作为植物激素，在植物对水分胁迫的防御反应中起重要作用。植物体通过激活信号转导体系来响应水分胁迫刺激，诱导体内ABA合成与抗性基因表达，提高植物体自身抗逆性。干旱胁迫及其信号转导机制在模式植物中已广泛开展研究，相关工作在其他农作物的研究不足。花生是我国重要的油料和经济作物，降雨量少或季节性干旱仍是花生产量和品质的主要制约因素之一。因此，研究花生抗旱分子机理，推动花生抗旱性的实际应用，具有重要意义。 本论文通过从耐旱花生品种中分离克隆一个胁迫相关NAC转录因子基因AhNAC2(Genebank注册号：EU755023)；分析AhNAC2基因结构信息和基因表达特征；证实AhNAC2蛋白的转录因子特性；分析异源表达AhNAC2植株的抗逆性；研究水分胁迫下AhNAC2对花生ABA合成关键酶基因AhNCED1转录调控的影响。认识花生AhNAC2的功能及其在水分胁迫过程中转录调控下游相关基因的可能作用，以期为花生从感受水分胁迫信号到促进ABA快速合成、提高植株抗旱性的分子机制提供依据。获得结果如下： 1)从花生中克隆了AhNAC2基因的完整基因组序列：获得的AhNAC2全基因组长度为2560bp，包含891bp的基因5’上游启动子序列和1759bp的基因转录区(1050bp的读码框序列，98bp和96bp的两个内含子序列，102bp的5’非翻译区和413bp的3’非翻译区)；AhNAC2预测编码349个氨基酸残基的蛋白，相对分子量为39.1kD，蛋白等电点为7.38，蛋白N端含有保守的NAC结构域，C端则高度变异；AhNAC2与大豆GmNAC4和拟南芥RD26的同源性分别为82.4％和71.1％，AhNAC2属于AtNAC3业家族。 2)花生AhNAC2基因的5’上游启动子区包含多种胁迫和激素响应元件，如ABRE、GARE、WRKY盒等；AhNAC2基因在成熟叶、幼叶、根、荚果和未成熟种子中都有表达；脱水、高盐、冷害和渗透胁迫均能诱导AhNAC2转录本上调；同时AhNAC2分别被植物激素ABA、GA3、SA和NAA上调。 3)融合蛋白AhNAC2-GFP定位于细胞核，蛋白N端区域决定其核定位功能；酵母活性分析确认GAL4-AhNAC2融合蛋白C端(191-349aa)为转录活性区域；原核表达纯化His-AhNAC2融合蛋白，体外EMSA证明His-AhNAC2蛋白与NACRE序列特异结合。 4)构建AhNAC2过表达载体，筛选获得拟南芥转基因纯系；在ABA处理下，过表达AhNAC2转基因拟南芥的根生长、萌发率、子叶绿胚率和气孔开度均显著低于野生型，表现ABA过敏感性；干旱胁迫下，转基因植株相比野生型具有更高存活率和较低叶片失水率，抗旱性提高；盐胁迫下，转基因植株的叶绿素含量和存活率均显著高于野生型；转基因植株在冷害处理下其存活率亦高于野生型；转基因植物中12个拟南芥胁迫相关基因表达相比野生型显著上调；过表达AhNAC2互补同源基因突变体rd26的部分ABA敏感性和抗旱表型。 5)花生水分胁迫初期，AhNAC2与AhNCED1的基因表达具有相关性；酵母单杂与体外EMSA实验证实，AhNAC2融合蛋白可以结合AhNCED1基因启动子F(1～456bp)和M(457～891bp)的DNA区段，而不能结合L(892～1418bp)区段；染色质免疫共沉淀分析证实，AhNAC2-GFP融合蛋白能在植物体内结合AhNCED1基因启动子DNA，F区结合效率比M区高，不结合L区。 6)稳定表达AhNAC2抑制pAhNCED1：：GUS转基因株系幼苗的GUS活性，PEG处理诱导稳定转基因植株幼苗韧皮部筛管细胞GUS活性特异表达，但相比对照变化较低；瞬时表达AhNAC2效应子提高pAhNCED1报告子GUS活性；在野生型Col中，PEG处理能显著提高AhNAC2对pAhNCED1报告子GUS活性的影响，ABA显著降低AhNAC2的影响，同时抑制AhNAC2蛋白丰度；在αbf3突变体中，互补表达ABF3效应子恢复AhNAC2对pAhNCED1报告子GUS活性的促进作用，ABA处理下，互补表达ABF3效应子恢复AhNAC2对pAhNCED1报告子GUS活性的抑制作用。 综上所述，花生AhNAC2是NAC基因家族的新成员，具有保守结构特征，基因启动子区域含多种逆境相关元件，响应干旱和ABA等胁迫；AhNAC2蛋白具有典型的转录因子特性，蛋白N端和C端分别决定其细胞核定位和转录活性的功能；AhNAC2可能通过调节胁迫相关基因表达提高植株的非生物逆境抗性，同时参与ABA介导的抗旱信号中；水分胁迫下AhNAC2直接结合AhNCED1基因启动子影响基因表达；AhNAC2可能通过ABF3介导的ABA信号抑制自身作用，从而反馈调控AhNCED1基因的转录水平。