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哺乳动物在进化上出现了高度发达的大脑皮层,它在调节动物机能上起着主要作用。大脑皮层发育是首先从胚胎干细胞分化为神经外胚层细胞,然后区域化为特异的神经干细胞,神经干细胞进一步发育分化为神经元和胶质细胞并构建多层皮层结构。在这些过程中有大量的信号分子参与,其中Notch信号通路对神经干细胞自我更新的维持和分化有关键调控作用。ADAM10是Notch信号通路激活过程中的一个关键限速酶,它在S2位点剪切是γ-分泌酶对S3位点剪切的必要条件。有研究表明,用Nestin启动子条件性敲除ADAM10的小鼠大脑皮层由于Notch信号受阻而出现结构混乱,其中大脑皮层也因在发育早期神经干细胞池数量减少而变薄。但是由于Nestin启动子在大脑皮层发育早期E9.5-E11.5天就已经启动,所观察到的表型是早期ADAM10缺失的结果,而ADAM10在小鼠大脑皮层发育晚期的具体功能是不清楚的。本实验首先用western blot和原位杂交以及免疫荧光的方法检测了小鼠大脑皮层发育过程E14.5-P1中ADAM10的蛋白和mRNA的表达情况。我们看到ADAM10在这一时期大脑皮层皮质板(CP)和脑室层(VZ)有一定表达,并且ADAM10与Notchl-NICD段的表达位置一致。我们结合了RNA干扰和子宫内电转的技术,降低在E14.5天小鼠大脑发育VZ区神经干细胞中ADAM10的表达,结果使皮层VZ区变薄和细胞结构松散,这表明这一时期ADAM10的在VZ区神经干细胞中的表达对于神经干细胞的维持有重要作用,与之前条件性敲除实验结果一致。我们通过对神经干细胞、胶质细胞、神经元细胞分别用Nestin、S100β、Tuj1做免疫荧光标记,结果表明ADAM10与S100p和Tuj1的表达区域在E16.5、E18.5、P1时期有在皮质板区一定的重合。这种表达模式显示在小鼠大脑皮层发育的后期ADAM10-Notch信号通路很可能也参与了神经元的成熟和胶质细胞的形成。但由于用RNA干扰后,没有细胞到达大脑皮层外侧皮质板区,ADAM10在CP区域的功能有待进一步验证。