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本研究建立了草莓离体叶片再生技术体系,以5个品种草莓组培苗为试材,应用草莓枯萎病菌毒素作为选择压力,筛选草莓抗枯萎病突变体。并对突变体再生植株与野生型植株的生长、分化、抗病性、抗性生理进行了研究。结果如下:1.以草莓叶片为外植体,明确了碳源、激素、AgNO3对叶片愈伤组织诱导的影响,建立了离体叶片再生体系。草莓叶片愈伤组织诱导的最佳条件为MS +麦芽糖30g/L + TDZ 3mg/L。适宜浓度的BA也能诱导出愈伤组织,但诱导出愈伤组织的质量低于TDZ诱导。2.草莓枯萎病菌粗毒素对植株和茎尖生长点均有较强的毒害作用,经粗毒素处理的植株能产生与枯萎病相似的症状。毒素浓度与茎尖枯死率呈正相关。粗毒素含量10%为丰香、全明星、童子1号、达赛莱克特等草莓品种诱变的适宜选择压力;森格纳草莓适宜选择压力为毒素含量15%。3.在含毒素的培养基上继代培养可提高不定芽对毒素的抗性。在连续培养过程中,5个品种草莓不定芽存活率均有所提高。在含毒素的培养基上突变体不定芽分化显著低于空白对照,但高于野生型不定芽对照。经毒素处理的突变体再生植株,其株高、根长和干重等生长指标均高于野生型植株。抗病性鉴定结果表明,突变体再生植株对枯萎病菌的抗性高于野生型再生植株。4.对筛选得到的2个突变体进行RAPD分析,发现有2个引物在2株突变体中的扩增产物与野生型不同。5.用草莓枯萎病菌处理突变体和野生型再生植株,测定6d内不同基因型植株根系内保护性酶活性的变化。测定结果表明,突变体再生植株根系内的保护性酶活力增强,其中SOD、CAT、POD酶活性的变化趋势基本一致,即先升高后降低,且病原菌处理的突变体植株酶活性始终高于病原菌处理的野生型植株。未经处理的突变体和野生型植株SOD、CAT、POD酶活性没有明显变化。经病原菌处理后突变体和野生型植株根系内MDA含量均呈上升趋势,突变体植株上升的幅度高于野生型植株。根系活力随着病原菌处理时间的延长逐渐下降,并且经病原菌处理的突变体植株根系活力始终高于病原菌处理的野生型植株。根系细胞膜透性变化趋势与根系活力相反,呈上升趋势,且经病原菌处理的突变体植株细胞膜透性始终低于野生型植株。未经病原菌处理的突变体和野生型植株根系内酶活性、MDA含量、根系活力和细胞膜透性无明显变化。