成骨生长肽(OGP10-14)改性聚乳酸仿生骨材料的制备及细胞相容性研究

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聚乳酸材料作为一种具有较好生物相容性的可降解材料,在组织工程领域具有广泛的应用前景。然而聚乳酸材料要真正应用于生物医学工程领域,还需要克服诸多缺陷,如亲水性和生物活性低等问题,仿生改性是克服这些缺限的有效途径。聚乳酸和聚乳酸仿生改性材料在理化性能及其生物相容性等方面的差异使聚乳酸仿生改性材料在组织工程领域的仿生骨修复研究更有价值。本研究是将成骨生长肽OGP(10-14)通过酰胺反应共价接枝到马来酸酐改性聚乳酸的支链上,制备得到一种新型聚乳酸基仿生骨修复材料(OGP(10-14)-MPLA),提高了聚乳酸材料的成骨活性。采用X射线光电子能谱仪(XPS)、傅立叶变换红外光谱仪(FTIR)、元素分析仪(EA)、氨基酸分析仪(AAA)、和差示扫描量热仪(DSC)等分析仪器对合成材料进行结构表征。并对合成材料的亲/疏水性,体外降解性能进行详细考察;最后对合成材料的细胞相容性进行评价。主要研究内容和结论如下:①OGP(10-14)-MPLA的制备和表征以1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)为缩合剂,将成骨生长肽OGP(10-14)中的氨基与马来酸酐改性聚乳酸材料(MPLA)中的酸酐通过酰胺反应,将OGP(10-14)接枝到MPLA侧链上。通过对材料样品的红外光谱分析、元素分析、氨基酸分析和X射线分析,其结果表明:活性多肽OGP(10-14)已成功接枝到马来酸酐改性聚乳酸支链上,得到新型聚乳酸仿生基质材料OGP(10-14)-MPLA,并通过数据分析得出OGP(10-14)在OGP(10-14)-MPLA材料中的平均含量约为2.46μmol/g,接枝效率为12.40%;DSC对材料检测结果表明,OGP(10-14)-MPLA的玻璃化转变峰值温度(Tg)为68.50℃,略高于MPLA的玻璃化转变峰值温度。②OGP(10-14)-MPLA的基本理化性能通过对MPLA和OGP(10-14)-MPLA材料的吸水率、静态水接触角进行检测,实验结果表明:与MPLA相比,OGP(10-14)-MPLA的静态水接触角较小、吸水率较高,因此改性后的聚乳酸材料提高了材料的亲水性。通过对OGP(10-14)-MPLA和MPLA材料进行体外模拟降解实验测定其所溶介质的p H值结果表明:与MPLA材料相比,OGP(10-14)-MPLA材料在降解过程中介质的p H值始终高于MPLA,材料的酸致自催化降解的程度降低,p H值变化速率也相对稳定。由于多肽OGP(10-14)的引入使材料的降解体系发生了变化,使OGP(10-14)-MPLA具有可控的降解性能。③OGP(10-14)-MPLA的细胞相容性研究将大鼠乳鼠的成骨细胞与MPLA和OGP(10-14)-MPLA聚合物材料在体外共培养,从细胞粘附形态、增殖、分化和矿化等几个方面考察了两种改性聚乳酸材料的生物相容性。结果表明:与在MPLA材料上培养的细胞相比,成骨细胞在OGP(10-14)-MPLA材料上的粘附比例更高,细胞形态更好,其增殖能力、分化能力和矿化能力都显著提高,成骨生长肽OGP(10-14)引入聚乳酸材料中,提高了材料的促成骨生物活性。综上,本课题将成骨生长肽OGP(10-14)通过酰胺反应成功接枝到马来酸酐改性聚乳酸材料上。获得的新型材料与未改性材料相比具有更好的亲水性和降解性能。细胞相容性评价表明:OGP(10-14)的生物活性得到保持并提高了接种在新型材料上的成骨细胞的粘附、增殖、分化和矿化,预示该材料有助于骨修复。
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