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牛围产期外周雌激素(E2)与中性粒细胞(PMNs)在母体启动分娩、产后恢复的生理性适应过程中发挥关键作用。PMN线粒体含量低,细胞自我供能水平有限,需要持续摄取利用外源葡萄糖或脂类维持其成熟分化与免疫激活。但在围产期能量负平衡(NEB)状态下,E2特征性动态变化与PMNs免疫活性是否高度关联、其内在机制有待揭示。本研究利用体外诱导试验,采用Western Blot、qRT-PCR、细胞免疫荧光、流式细胞术等技术,探讨E2调节PMNs葡萄糖代谢的自噬机制及其免疫活性效应,从而阐释牛围产期NEB状态下E2调节PMNs葡萄糖代谢的机制。本试验首先研究E2对PMNs免疫活性的影响,分离细胞后分别用低浓度E2(L-E2;20pg/mL)、中浓度 E2(M-E2;450 pg/mL)、高浓度 E2(H-E2;880 pg/mL)诱导细胞2h,其中H-E2组添加雌激素受体拮抗剂ICI182780(10-6M)且预处理1h,收集细胞和培养液进行后续实验。其次研究了 E2对低糖状态PMNs自噬活性的影响,在低浓度葡萄糖(L-G;2.5 mM)培养体系加L-E2、M-E2、L-E2诱导细胞2h并收集细胞进行后续实验。最后研究E2对高糖状态PMNs自噬活性的影响,在高浓度葡萄糖(H-G;25 mM)培养体系中加L-E2、M-E2、L-E2诱导细胞2h并收集细胞进行后续实验。结果显示,E2促进ERα和GPR30表达(p<0.01)但抑制了 ERβ(p<0.01);L-E2激活p65并促进下游细胞因子的释放(p<0.01);H-E2抑制p65激活(p<0.05)并抑制细胞因子的释放(p<0.01),与H-E2组相比,加入ICI后促进p-p65蛋白表达(p<0.01)和细胞因子释放(p<0.01)。L-E2 激活 AMPK(p<0.01)而 H-E2 抑制 AMPK(p<0.01),与H-E2组相比,加入ICI后抑制AMPK蛋白表达(p<0.01)。与L-G组相比,L-G+E2组ATP和MDA含量显著增加(p<0.01),SOD含量、ROS含量、GLUT1、GLUT4蛋白表达以及凋亡显著降低(p<0.01),随着E2浓度增加自噬相关蛋白Beclin1、Atg5、LC3B-Ⅱ呈浓度依赖性增加(p<0.01)、p62呈浓度依赖性降低(p<0.01)。与H-G组相比,H-G+E2组细胞凋亡无变化(p>0.05),GLUT1、GLUT4蛋白表达、ATP含量、ROS含量以及MDA含量显著降低(p<0.01),SOD含量显著增加(p<0.01),随着E2浓度增加自噬相关蛋白Beclin1、Atg5、LC3B-Ⅱ呈浓度依赖性增加(p<0.01)、p62呈浓度依赖性降低(p<0.01)。综上得出结论:E2依赖ERα和GPR30受体、通过促进自噬对糖代谢所致PMNs功能损伤发挥重要的保护作用。