MCFP对肝癌细胞生物行为学影响初步研究

来源 :安徽医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dingchao0907
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
真核细胞线粒体是能量代谢的主要场所,线粒体的功能主要依赖于内膜上各种可溶性物质的跨膜转运,这种转运工作主要由可溶性物质载体(solute carrier,SLC)完成的。这些可溶性物质载体定位于线粒体内膜,组成了转运蛋白质家族(mitochondrial transporter family),主要包括SLC25家族。目前发现的SLC25家族成员共有14种,其中SLC25A40又名线粒体载体功能蛋白(mitochondrial carrier functional protein,MCFP),是中枢神经系统中鉴定到的SLC25家族新成员之一。MCFP作为一个新发现的基因,国内外有关其研究报道甚少。本研究首先通过普通PCR检测肝癌细胞系和正常肝细胞MCFP表达情况,实验证明大部分肝癌细胞系如HepG2细胞中MCFP表达量高于正常肝细胞。我们通过RNAi序列设计软件进行MCFP干涉片段设计,筛选出MCFP基因的RNAi有效靶序列,进一步合成靶序列的Oligo DNA,构建pSiCoR -MCFP慢病毒载体并包装产生慢病毒干涉毒液。运用病毒感染肝癌细胞系和正常肝细胞获得稳定干涉MCFP的细胞株,利用PCR和Western-blot方法检测稳定HepG2细胞株中MCFP的干涉效果,并运用稳定干涉HepG2细胞株检测干涉MCFP以后细胞行为学及线粒体功能的改变。实验成功构建具有MCFP干涉效果的慢病毒干涉载体并获得了稳定干涉MCFP及对照的稳定细胞株。干涉MCFP后,HepG2细胞株中MCFP蛋白表达水平明显降低;细胞行为学方面细胞增殖明显减缓,细胞周期发生S期阻滞,在恶劣条件下细胞凋亡明显增加;线粒体功能方面干涉MCFP以后ATP含量降低,复合体I,II,IV,V活性明显下降。在本研究中我们探索了干涉MCFP以后HepG2细胞的细胞行为学及线粒体功能均发生变化,这一结果有助于我们进一步了解MCFP在HepG2细胞中的调控作用。对于MCFP功能的初步研究,为揭示线粒体蛋白质的功能及调控机制乃至其在疾病发生发展过程中的作用提供了线索。
其他文献
目的:乳腺癌为全身性疾病,术后仍有一部分患者出现复发转移,辅助化疗做为全身性治疗手段在乳腺癌的治疗中起着重要作用。葸环类药物是治疗乳腺癌最有效的药物之一, 20世纪80
生卒年不详,北宋画家。字子两,豪粱(今安徽风阳东)人。性情疏放。擅画花竹、禽鸟,尤工秋荷凫雁,注重写生,精于钩勒填彩,体制清赡,在继承徐熙、黄筌两体的基础上另创一种清淡疏秀之格,一
透排水沥青路面能快速排除路表积水,减少水漂、水雾的产生,提高行车安全性。“海绵城市”的提出,使得多层透排水的海绵型道路受到越来越多的关注,但关于透排水路面结构设计及
目的:肺癌是目前发病率和死亡率最高的恶性肿瘤之一,对放疗、化疗敏感性均较差。因此,从生物体内寻找高效、低毒的抗肿瘤药物已成为抗肿瘤研究及新药开发的重要组成部分。去
烟台恤养院,是由烟台红卍字会筹办的,从创办迄今已有80多年的历史了,主要收养社会上无依无靠的孤老残幼、憨傻痴呆人员,它是一所包容多行业、能自给自足的慈善团体,随着社会
分析件杂货码头设备吊装工艺特征,总结吊装工艺的规则,针对设备多样性导致的决策耗时问题,采用知识工程中的知识表示方法,利用产生式系统构建吊装工艺规则,并根据设备吊装工艺的不
以农业上市公司可持续融资能力为对象,对农业上市公司融资结构问题进行深入的分析,并结合我国的现实国情,提出了改善我国农业上市公司融资状况的对策及建议。
在全球经济一体化、文化多元化的大背景下,我国的国际文化交流日益繁荣,艺术专业大学生的英语水平也需要跟上时代和社会的发展。高校艺术类大学生是英语学习的一个特殊群体,
目的:检测急性髓系白血病(AML)患者外周血细胞中金属硫蛋白1F (MT1F)mRNA与血管内皮生长因子(VEGF) mRNA的表达水平,探讨两者与AML发生、发展和预后的关系及意义。方法:采用实
利用生活中的常见资源制作成低成本学具开展冀少版《生物学》教学,能有效激发学生参与学习的欲望、突破学习重难点、强化学生对知识的理解、建构生物学模型,提高初中生物学学