姜黄素的提取、分离及抑菌、抗肿瘤活性研究

被引量 : 0次 | 上传用户:euufhuhfu
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
近年来,随着癌症发病率的不断升高,天然药物抗肿瘤作用日益成为研究热点,尤其是近年来国外也逐步重视对天然药物的应用。本文以常用中药姜黄为材料,通过探索姜黄素的测定方法、分离方法、超高压提取方法,挥发油成分的鉴定,姜黄素的抑菌、抗肿瘤活性及挥发油抑菌的检测,建立了姜黄从有效成分提取到活性鉴定的实验方法。实验具体分为七部分:一、姜黄素的测定方法通过对分光光度法及高效液相色谱法对姜黄素总含量的测定,发现姜黄素的含量与分光光度法中的吸光度及高效液相色谱法中的峰面积均成线性关系,且回收率及精密度实验均显示两种方法可靠稳定,但将两种方法的测定结果进行了比较,发现光度法的测定结果略高于色谱法。二、姜黄素的分离方法分别使用C18与C30柱,考察了三种姜黄素的分离效果,结果表明使用甲醇-水等度洗脱,在相同的洗脱条件下,三种姜黄素在C30柱上的分离效果远远优于C18柱,使用组成简单的甲醇-水为流动相,不必使用复杂的梯度洗脱程序就可以获得基线分离,并且分离时间也令人满意。并根据三种组分的化学结构、相对极性、色谱保留时间及紫外光谱特征分析,对三个色谱峰进行了鉴定,分别为去二甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素和姜黄素。三、气相色谱-质谱分离与鉴定姜黄挥发油成分从姜黄提取的挥发油中分离出32个色谱峰,共鉴定了22个,占被测总量的85.94%,其主要成分为:芳姜黄酮(16.06%)、β-姜黄烯(11.40%)、β-倍半水芹烯(7.27%)、大根香叶酮(6.86%)、表-α-绿芹烯(5.85%)、芳-姜黄烯(5.43%)、α-姜黄酮(5.38%)、桉树脑(5.25%)和苯甲醇(5.24%)。这与文献报道的姜黄挥发油的组成主要以萜类化合物为主基本一致。四、超高压提取姜黄素的工艺参数优化在测定提取溶剂、溶剂浓度、压力、提取时间、固液比、提取次数等因素对提取率的影响基础上,通过正交实验确定超高压提取过程中的最优因素组合。通过实验发现UHPE最佳提取工艺条件为:乙醇浓度70%,液固比为45:1,压力为350 MPa,提取时间3.5 min。在上述最佳提取工艺条件下,重复提取3次,总姜黄素的平均提取率为28.82 mg·g-1,大于正交实验结果中的最高值(28.49 mg·g-1),说明利用正交实验优化UHPE提取姜黄素的提取工艺是成功的。五、姜黄素的抑菌作用研究提取姜黄素,利用平板打孔法和药液二倍稀释法对抑菌作用进行定性、定量测定。结果:一定浓度的姜黄色素对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、酵母菌、黑曲霉、白地霉都有抑制作用,其抑菌作用强弱的顺序为:大肠杆菌>黑曲霉>枯草芽孢杆菌>酵母菌>白地霉,对大肠杆菌的最低抑菌浓度是0.78mg/ml,对黑曲霉的最低抑菌浓度是1.56mg/ml,对枯草芽孢杆菌的最低抑菌浓度是1.56mg/ml,对酵母菌的最低抑菌浓度时3.125mg/ml,对白地霉的最低抑菌浓度是6.25mg/ml。六、姜黄挥发油的抑菌活性研究用石油醚提取姜黄挥发油,除去石油醚,收集挥发油,配制成相应的浓度。利用平板打孔法和药液二倍稀释法对抑菌作用进行定性、定量测定。结果显示姜黄挥发油对大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌、产阮假丝酵母菌和白地霉均有抑菌作用,且大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、酵母菌、产阮假丝酵母的最低抑菌浓度为6.25mg/ml,白地霉的最低抑菌浓度为3.125mg/ml,但对黑曲霉无抑菌作用。其中姜黄挥发油对白地霉的抑制作用最强。七、姜黄素对HepG2细胞增殖的影响用不同浓度的姜黄素处理人肝癌细胞株HepG2细胞,采用MTT法测定姜黄素对HepG2细胞增殖的抑制作用,结果显示,姜黄素可显著抑制肝癌细胞株HepG2的生长,且呈现明显的时间和剂量依赖性,抑制效果在一定浓度范围内随着浓度的升高而增大,但超过一定浓度以后效果反而会降低,姜黄素浓度为20μmol/L作用48 h时抑制效果最好。
其他文献
高中物理新课程改革提出的三维目标是“知识和能力”、“过程和方法”、“情感态度和价值观”。新课程标准强调在实践中学习,“总目标”指出“能主动进行探究性学习,强调‘过
音乐表现力是声乐教学的精髓,其直接关乎学生的歌唱水平和技能,重要性不言而喻。本文着重探讨了音乐表现力在声乐教学中的提升策略,以期为我国声乐教学提供新的思路。
1996年1月由北京大学出版社出版的新编《法理学》,是由国家考委组织编写的全国高等教育自学考试律师专业法理学课程的教材,这本教材与原来全国高等教育法律专业自考教材相比
写作作为一种重要的输出方式是语言学习过程中不可缺少的一部分。然而,无论对老师还是学生来说,写作都是一件困难的任务。从总体上来看,英语写作教学的情况是不容乐观的。一
随着银行现有业务的不断扩充和信贷业务种类的不断增加,银行信贷管理系统面临着多种问题,包括不同的硬件平台、不同的网络环境、不同的数据库之间的互操作性,多种应用模式并
一、論文1.政治·地理金子修一,権力と皇后,中国女性史研究(26),1—13,2017-02。菅沼愛語,隋の東部ユーラシア規模での世界戦略:北方と西方への遠交近攻、以夷制夷の対外
<正> 强有力的思想政治工作本来是我们党的优势,是我们党的传家宝;但近年来却被严重地削弱了,甚至被丢掉了。然而这种情况则是在一片“加强”的呼喊声中发生的。这些年来,有
随着高职教育的蓬勃发展和改革的不断深入,高职教师正面临着严峻的挑战,高职教师的整体素质的提高成为一个关键问题,关系到高职教育发展的全局。而继续教育是提高高职教师整
刑事侦查权是国家惩治犯罪的重要公权力。我国刑事侦查权主要由公安机关和检察机关行使。我国宪法规定,检察机关是法律监督机关,但刑事诉讼法又赋予了检察机关对职务犯罪的自
信托合同,是我国和大陆法系国家信托法中的概念,它是设立信托的一种方式,也是信托制度运用的主要方式。信托合同区别于普通的合同,有其自身的特殊性,通过对信托合同本质与特