【摘 要】
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BRI(Brain Protein I3)作为BRI基因家族的一个成员,属于Ⅱ型单跨膜蛋白,只有一个跨膜区,N端较短,C端较长.生物信息学软件分析结果:N端在胞内,C端在胞外;没有任何明显的定位信号和功能结构域.Northern杂交结果显示,该基因主要在脑表达.为了进一步了解BRI基因在脑组织中的表达分布情况,该文克隆了hBRI的小鼠同源基因(mBRI),以3非编码区的一段序列为模板设计并转录了原
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BRI<,3>(Brain Protein I3)作为BRI基因家族的一个成员,属于Ⅱ型单跨膜蛋白,只有一个跨膜区,N端较短,C端较长.生物信息学软件分析结果:N端在胞内,C端在胞外;没有任何明显的定位信号和功能结构域.Northern杂交结果显示,该基因主要在脑表达.为了进一步了解BRI<,3>基因在脑组织中的表达分布情况,该文克隆了hBRI<,3>的小鼠同源基因(mBRI<,3>),以3非编码区的一段序列为模板设计并转录了原位杂交探针.用小、大鼠的中枢神经系统切片和小鼠整体胚胎进行原位杂交,研究小鼠的mBRI<,3>mRNA在中枢神经系统组织和细胞中的分布.实验结果显示,mBRI<,3>mRNA在大脑皮层、海马、蒲根野细胞层、桥脑面神经核、颞叶皮层以及脊髓前角神经元中高表达.为进一步了解hBRI<,3>蛋白的亚细胞定位,该文构建了真核表达载体pEGFP-N1-BRI<,3>(绿色荧光蛋白融合表达质粒),转染SH-SY5Y细胞.利用共聚焦显微镜进行观察发现,荧光信号主要存在于细胞核周围并呈斑块状分布.该文选择hBRI<,3>蛋白特异性较好的N端作为"诱饵"蛋白,利用酵母双杂交系统筛选人胎脑cDNA文库中可能与之相互作用的蛋白质.SCG10蛋白作为stathmin蛋白家族的一个成员,具有抑制微管组装,促进微管去组装的功能,对神经元细胞的轴突生长具有明显的促进作用.在阐明BRI<,3>和SCG10蛋白之间存在相互作用的基础上,我们进一步研究了BRI<,3>蛋白对SCG10蛋白引起的微管解聚过程的影响以及对神经元细胞微管组织的影响.
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