用抗旱转录因子提高农作物的的抗旱性是目前研究的热点。本研究构建了一种具有级联放大作用并带有表型标记的诱导型植物双价表达载体。该表达系统可在干旱等逆境条件下，通过级联放大的方式诱导表达，在增加植物抗逆性的同时，增加叶片表层蜡质的累积，达到易于表型识别的目的。本研究主要内容如下： ⑴用野生型拟南芥进行胁迫试验，通过PR-PCR半定量方式以检验胁迫条件下CBF3基因、WIN1基因、RD29A基因、LEA14基因诱导的表达，为植物表达载体的构建提供技术支持。采用PCR方法从拟南芥克隆获得冷诱导转录因子CBF3基因，蜡质合成相关WIN1基因，干旱诱导RD29A基因启动子和冷诱导的LEA14基因启动子，并用CBF3转录因子所调控的下游RD29A基因启动子和LEA14基因启动子分别驱动CBF3基因利WIN1基因表达，成功构建了双价植物表达载体RD29AP-CBF3/LEA14P-WIN1/pCAMBIA2201。 ⑵重组质粒通过冻融法转化根癌农杆菌GV3101，转化烟草，经不定芽诱导、生根培养，获得转基因烟草植株。转基因烟草植株经卡那霉索检测、PCR、RT-PCR检测、初步表明目的基因已整合到烟草基因组中，并可以正常转录。 ⑶本研究只得到了初步的实验结果。本实验为今后转基因抗旱育种提供了一种切实可行的新思路，为利用花粉管通道法转化棉花，提高抗逆转基因棉花田间筛选的效率打下了基础。