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目的:选择性剪接(alternative splicing,AS)的异常严重影响肿瘤的发生和发展,特别是由剪接因子异常表达引起的肿瘤已经受到医学领域的广泛关注。富含丝氨酸/精氨酸的剪接因子家族(SR家族)调控前体mRNA的剪接。已有研究证明,富含丝氨酸/精氨酸的剪接因子3(SRSF3)是诱发肝癌、胃癌、直肠癌等许多肿瘤的关键癌基因,但是SRSF3在宫颈癌中的功能及机制尚不清楚。为了明确SRSF3在宫颈癌中发挥的具体功能和作用机制,我们对此进行深入研究。方法:构建SRSF3和DDX5长型、DDX5短型的表达质粒,通过细胞培养,构建稳定过表达的SRSF3和DDX5长型、DDX5短型的HeLa细胞稳转株。通过CCK-8(Cell Counting Kit-8),细胞克隆形成实验等体外细胞实验,分析细胞的增殖能力。通过细胞划痕(wound healing)和transwell实验,分析细胞的迁移和侵袭能力。通过DDX5长型/短型的Rescue实验进一步研究这两种蛋白对细胞增殖和迁移侵袭能力的影响。通过荧光定量PCR实验,研究DDX5长型和短型对AKT的转录调控作用。又通过生物信息学分析,研究SRSF3同AKT之间和DDX5长型/短型同AKT之间的mRNA表达水平的相关性。结果:首先,通过TCGA数据库发现SRSF3在宫颈癌组织样本和癌细胞系中高表达,暗示着SRSF3是一种促癌基因。之后的实验表明,稳定表达SRSF3促进了HeLa细胞的增殖迁移和侵袭,而敲低SRSF3则会抑制这些进程。其次,有研究表明,SRSF3作为一种剪接因子,能够调节RNA解螺旋酶DDX5外显子12的选择性剪接。在我们实验中发现,SRSF3敲低后能够导致DDX5短型的mRNA产生,而过表达SRSF3会减少DDX5短型的剪接百分比(PSI)。有趣的是,SRSF3的过表达,会抑制DDX5短型蛋白的稳定性。之后探讨DDX5长型和DDX5短型对HeLa细胞的影响,结果证明了DDX5长型促进了HeLa细胞增殖、迁移和侵袭,而DDX5短型则抑制了HeLa细胞增殖、迁移和侵袭,二者对宫颈癌表现出不同的调控作用,从而进一步表明SRSF3对DDX5的剪接调控是有意义的。最后,我们继续探究SRSF3在宫颈癌中的促癌机制。之前有报道,DDX5是AKT的转录辅助因子,而AKT能够促进宫颈癌的发生发展。与先前的研究结果一致,我们发现DDX5长型可以促进AKT的转录,DDX5短型会抑制AKT的转录。为了明确SRSF3与AKT之间是否存在联系,我们通过实验发现,SRSF3可以促进AKT的表达水平升高。结论:高表达的SRSF3,促进DDX5外显子12的包含,促进DDX5长型增多,激活宫颈癌中AKT信号通路,从而促进宫颈癌细胞的增殖和侵袭迁移能力;而低表达的SRSF3,促进DDX5外显子12的跳读,抑制DDX5长型表达,促进DDX5短型增多,进而抑制了AKT信号通路,从而降低宫颈癌细胞的增殖和侵袭迁移能力。总之,剪接因子SRSF3是通过SRSF3-DDX5-AKT信号轴参与宫颈癌的发生发展。综上所述,我们认为,在宫颈癌中SRSF3能够促进肿瘤的发生发展,是一个潜在的肿瘤生物标志物和治疗预后的靶点。