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外生菌根(Ectomycorrhiza, ECM)是由土壤真菌与植物根系形成的互惠共生体。ECM真菌在自然界中分布广泛,是生态系统的重要组成部分,在森林生态系统的演替以及干扰生态系统的恢复与重建过程中发挥重要的生态功能。亚热带常绿阔叶林是我国典型的森林生态系统之一,具有丰富的植物和菌根真菌多样性。本文在我国浙江古田山的亚热带常绿阔叶林中,选择三个不同森林演替阶段的比较样地(Comparative Study Plot, CSP),即演替早期(10-20年)、演替中期(40-50年)和演替晚期(>70年),利用形态、DNA高通量测序(Roche454Pyrosequencing)和ITS条形码技术,分析CSP样地内地上ECM真菌子实体和地下ECM真菌的种类组成,并进行ECM真菌与森林演替及环境因子的回归分析,取得如下结果:1) CSP样地中ECM真菌子实体的调查在CSP样地中共采集到ECM真菌子实体235份,根据子实体的形态和显微特征鉴定为95种,其中牛肝菌科(Boletacea)31种,个体数为117份;鹅膏菌科(Amanitacea)21种,个体数51份;红菇科(Russulacea)19种,个体数为24份;其他科的ECM真菌24种,个体数43份,其中牛肝菌科的物种最为丰富。2) ECM真菌子实体的群落组成与多样性随森林的演替而变化子实体中,牛肝菌科的多样性从演替早期、中期到晚期逐渐降低,依次为17种、15种和14种;而鹅膏菌科的多样性则逐渐增加,演替早期为7种、演替中期为9种、演替晚期为12种;红菇科在三种演替阶段的种类数分别为7种、8种和5种。森林演替阶段对ECM真菌子实体多样性无显著影响,但是样地的坡度和土壤含水量等地形因子显著影响ECM真菌的多样性。森林的演替和植物群落组成,如草本植物的盖度和落叶植物的相对多度等因素都对ECM真菌的群落组成有显著影响。3) CSP样地中林地下ECM真菌的调查与序列分析利用DNA高通量测序技术,从CSP样地的地下植物根系内共得到59741条ECM真菌的ITS序列,其中演替早期、演替中期和演替晚期的样地内分别有23357、16747和14169条;以97%的ITS序列相似度将其划分为4361个OTUs (operational taxonomicunit);OTUs数从演替早期、中期到晚期呈现出先减少后增加的趋势。分子系统进化结果表明,4361个OTUs分为36个进化分支类群。包括/amanita,/amphinema-tylospora,/austropaxillus,/boletus,/byssocorticium,/cantharellus,/cenococcum,/ceratobasidium,/clavulina,/coltricia,/cortinarius,/elaphomyces,/entoloma,/hebeloma-alnicola,/helotiales,/hydnellum-sarcodon,/hygrophorus,/hysterangium,/inocybe,/laccaria,/marcelleina-peziza,/paxillus-gyrodon,/phellodon-bankera,/piloderma,/pisolithus-scleroderma,/pseudotomentella,/ramaria-gautieria,/russula-lactarius,/sebacina,/sordariales,/suillus-rhizopogon,/tomentella-thelephora,/tomentellopsis,/tricholoma,/tuber-helvella,/tulasnella。4) ECM真菌多样性及群落组成和森林演替阶段之间相关性的分析早期林中有34个进化分支类群,演替中期林中有28个进化分支类群,演替晚期林中存在29个进化分支类群,其中有23个进化分支类群在3个演替阶段中均有存在。/boletus,/tomentella-thelephora,/russula-lactarius是CSP样地中的优势类群,/austropaxillus,/coltricia,/hebeloma-alnicola,/paxillus-gyrodon是稀有类群。在演替早期的森林样地中,/boletus是最优势类群,其次是/russula-lactarius,/cortinarius,/tomentella-thelephora;在演替中期的树林中,/boletus也是最优势类群,其次是/tomentella-thelephora,/russula-lactarius,/amanita;在演替晚期的树林中,/tomentella-thelephora是最优势类群,其次为/russula-lactarius,/helotiales。分析结果显示,森林演替对ECM真菌的多样性和群落组成均有显著影响,同时ECM真菌的组成和多样性与环境因子之间密切相关,地上植被组成、菌根植物的相对多度、地表凋落物、坡度、坡向、海拔和降雨量等因素都会对ECM真菌多样性及群落组成有显著影响。