大鼠Sac磷酸磷脂酰肌醇磷酸酶家族新成员rSac3基因的筛选、鉴定及功能研究

来源 :中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所 中国科学院上海生命科学研究院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:siyang2003
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Sac结构域家族蛋白是近年来发现的一类具有磷酸磷脂酰肌醇磷酸酶(phosphoinositide phosphatase,PIPPase)活性的蛋白,该家族成员参与了调节细胞内运输和细胞骨架的组织等多种重要生物学功能。利用学习记忆的行为学模型,本研究在大鼠中筛选得到了含有Sac结构域的新成员,并将其命名为rat Sac3(rSac3)。研究发现,rSac3在大鼠组织中存在广泛表达,尤其在神经系统中具有相对较高的表达。亚细胞定位实验结果显示,rSac3蛋白定位于内质网,高尔基体等细胞内运输相关的细胞器上,揭示了rSac3可能参与了细胞内运输过程。 原核表达的rSac3 Sac结构域具有磷酸磷脂酰肌醇磷酸酶活性,具有水解PI(3)P、PI(4)P和PI(3,5)P2的活性。在磷酸酶活性中心引入点突变则可以抑制rSac3的磷酸酶活性。在神经生长因子(NGF)诱导PC12细胞神经元分化的体外模型中,本研究发现,随着神经突(neurite)的生长,rSac3的表达量明显上调,提示rSac3可能与神经突生长有关。在PC12细胞内过表达rSac3可以促进神经突的生长,反之,使用反义核酸(antisense oligonucleotide)抑制rSac3的表达则可以抑制PCI2细胞神经突的生长。过表达rSac3的点突变体对PC12细胞神经突生长没有明显的作用。 以上结果提示,rSac3通过参与从内质网、高尔基体向细胞质膜的运输过程,促进了NGF诱导的PC12细胞神经突的生长,这种促神经突生长作用与其磷酸磷脂酰肌醇磷酸酶活性是密切相关的。行为学功能研究也表明,Sac3可能参与了小鼠的学习记忆过程。
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