杂种鹅掌楸抗菌活性成分的分离鉴定

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近年来由于抗生素的过度应用,造成细菌耐药性广泛产生,从传统中药中寻找新抗菌药物受到普遍关注。鹅掌楸属(Liriodendron)是木兰科植物,现存2个种,分别为中国鹅掌楸Liriodendron chinense(Hemsl.)Sarg和北美鹅掌楸Liriodendron tulipifera L.,1963年,我国林学育种学家叶培忠首次选育出杂种鹅掌楸Liriodendron chinense×tulipifera。研究证明,鹅掌楸属植物主要含有生物碱类、倍半萜类、黄酮类、苯丙素类等成分,具有抗菌、抗疟疾、抗氧化等作用。本试验对杂种鹅掌楸叶进行了抗菌活性部位的筛选、抗菌活性部位成分的分离鉴定及其单体化合物的抗菌作用研究,取得以下结果:(1)杂种鹅掌楸抗菌活性部位的筛选采用试管预试法对杂种鹅掌楸化学成分进行预试验,通过乙醇回流提取制备杂种鹅掌楸醇提物,采用系统溶剂提取法萃取制备杂种鹅掌楸醇提物的不同部位,并通过琼脂平板法和微量肉汤稀释法检测各部位的抗菌作用。结果表明,杂种鹅掌楸中含生物碱、香豆素、内酯、多糖、黄酮类、有机酸以及挥发油等化学成分;杂种鹅掌楸石油醚、氯仿、乙酸乙酯提取物对沙门菌、金黄色葡萄球菌和链球菌有不同程度的抗菌作用,其中氯仿部位作用最强,抑菌圈直径分别为18.0、16.0和17.0mm,为高度敏感,最小抑菌浓度(MIC)分别为0.625、0.3125和0.3125mg/m L,最小杀菌浓度(MBC)分别为1.25、0.3125和1.25mg/m L;各部位提取物对大肠埃希菌,以及正丁醇、水部位提取物无抗菌作用。说明杂种鹅掌楸抗菌活性成分属于极性较小的化合物。(2)杂种鹅掌楸抗菌活性部位成分的分离鉴定杂种鹅掌楸氯仿部位提取物,依次用不同比例的二氯甲烷-乙醇梯度洗脱进行分离,并进行多次硅胶柱色谱和薄层色谱法,共得到3种单体化合物,经理化性质、13C-NMR、1H-NMR和质谱图测定分析,鉴定结构为:7-羟基-6-甲氧基香豆素(7-hydroxy-6-methoxycoumarin)、紫丁香苷(syringin)和β-谷甾醇(β-sitosterol),其中紫丁香苷含量较高。(3)杂种鹅掌楸活性部位分离化合物的抗菌作用采用琼脂平板法和微量肉汤稀释法,以大肠埃希菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌、链球菌标准株及临床分离株为供试菌,对7-羟基-6-甲氧基香豆素、紫丁香苷、β-谷甾醇进行体外抗菌试验。结果表明紫丁香苷抗菌活性较好,对大肠埃希菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌、链球菌标准株抑菌圈直径分别为8.3、9.3、10.7和11.3mm,为低、中度敏感,MIC在0.25~1.0mg/m L之间,MBC在0.5~2.0mg/m L之间。
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