目的:肾小管上皮细胞（tubular epithelial cells,TECs）损伤和管周毛细血管稀疏化（peritubular capillaries,PTCs）是急性肾损伤（acute kidney injury,AKI）的重要病理特征。我们课题组之前的研究发现在AKI过程中,缺氧的TECs产生和分泌外泌体增加。但是TECs外泌体对管周毛细血管损伤修复的作用和机制尚不清楚。本研究拟通过体内、体外实验,探讨TECs外泌体在AKI过程中,对管周毛细血管损伤修复的作用和机制。方法:我们首先构建肾脏缺血再灌注（I/R）损伤模型,模型构建后的第1天、第3天和第7天处死小鼠并收集血和肾脏组织标本,进行肾功能分析、病理染色以及分子生物学实验。为了探究TECs外泌体对PTCs的作用,我们对缺氧TECs外泌体进行分离和鉴定,将缺氧TECs外泌体与脐静脉内皮细胞共培养。此外,我们通过构建transwell共培养系统观察脐静脉内皮细胞对TECs外泌体的摄取情况。最后,通过尾静脉注射sh RNA慢病毒敲降Rab27a,抑制外泌体的分泌,并构建缺血再灌注小鼠模型,观察抑制TECs外泌体分泌对肾脏炎症及管周毛细血管内皮细胞增殖的影响。结果:研究发现,在第1天和第3天,缺血再灌注小鼠出现显著的血肌酐水平升高,肾小管上皮细胞萎缩、坏死,伴有管腔扩张,可见蛋白管型以及空泡样变性,肾脏间质伴有巨噬细胞浸润增多等组织病理学改变。CD31内皮细胞标志物染色发现,肾小管周围毛细血管密度在AKI小鼠显著减低。此外,与假手术组相比,I/R小鼠肾小管损伤标志物KIM-1和炎症相关因子ICAM-1、VCAM-1、MCP-1以及TNF-αm RNA表达水平均升高,VEGFA m RNA水平变化不显著。免疫荧光染色及Western Blot检测PCNA发现,缺血再灌注处理的肾脏TECs及PTCs增殖增加,并且PCNA在第1,3天显著高表达。体外研究中,我们提取培养小管上皮细胞HK2的外泌体,电镜、Western blotting检测外泌体标志物及NTA进行鉴定,证实外泌体的典型形状及大小（缺氧及正常细胞外泌体粒径分布为145.9nm,156.5 nm）,且缺氧HK2分泌外泌体增加。与常氧TECs外泌体相比,外源性加入缺氧TECs外泌体可以明显诱导脐静脉内皮细胞的增殖,ICAM-1,VCAM-1和TNF-αm RNA表达上调。有趣的是,在I/R模型的肾脏组织和缺氧的HK-2细胞提取的外泌体中,我们均观察到VEGFA装配的上调。使用si RNA敲降HK-2细胞VEGFA的表达,并提取外泌体,发现其对脐静脉内皮细胞的促增殖作用明显减弱。而Transwell共培养发现,DIO标记的TECs分泌的外泌体可以被下室的脐静脉内皮细胞摄取,进一步流式分析显示,使用si RNA抑制内皮细胞VEGFR的表达后,外泌体的摄取显著减少。在I/R模型中,通过慢病毒敲降Rab27a抑制外泌体分泌,可以显著抑制管周毛细血管的增殖和肾脏炎症反应。结论:本研究发现,缺氧小管上皮细胞释放外泌体并通过转运VEGFA促进PTCs的增殖和炎症反应,揭示了外泌体介导的小管上皮细胞-内皮细胞间对话的新机制,为理解AKI损伤修复机制及发现新的治疗策略提供了新的思路。