本文基于抗菌药物分析检测的重要意义和自组装环荧光显微成像技术的特点及其在药物分析中的应用,建立了甲苯磺酸妥舒沙星(TSFX)、左氧氟沙星(LVFX)和洛美沙星(LMX)的分析方法,并应用于鸡血清、鸡肉、肝脏、粪便；兔子血清、兔肉、肝脏和肾脏；药片、胶囊、注射液中药物含量的检测。此外,本文还应用荧光光谱法、紫外-可见吸收光谱法、傅里叶变换红外光谱法和分子模拟的方法研究了甲苯磺酸妥舒沙星TSFX.酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素(ATLL)与牛血清白蛋白(BSA),呋喃西林(NF)与人血清白蛋白(HSA)的相互作用。在pH10.50的NH3-NH4C1缓冲溶液和PVA-124存在下,Mn2+和CTMAB作为敏化剂,甲苯磺酸妥舒沙星(TSFX)在疏水性玻璃表面上形成自组装环。当点样体积为0.2μtL时,线性范围为4.05×10-14～4.28×10-13mol-ring-1(2.02x10-7～2.14×10-6mol·L-1),检出限为4.05×10-15mol·ring-1(2.02×10-8mol·L-1)。实测了甲苯磺酸妥舒沙星片剂中TSFX的含量和兔子灌喂甲苯磺酸妥舒沙星片剂后不同时间血清中TSFX的浓度,平均回收率在90.0～105.0%,相对标准偏差(RSDs)小于3.3%。在pH9.30的NH3-NH4Cl缓冲溶液中,Mn2+和CTMAB作为敏化剂,PVA-124作为辅助成环剂,建立了检测左氧氟沙星(LVFX)的方法,并实测了盐酸左氧氟沙星胶囊、片剂,鸡血清、鸡肉、鸡肝和鸡粪便中LVFX的浓度。当点样体积为0.2μL时,线性范围为5.66×10-14～1.00×10-13mol-ring-1,检出限为5.66x10-15mol-ring-1。该方法应用于鸡血清、鸡肉、鸡肝、鸡粪便和药物制剂(药片、胶囊)中LVFX的测定时回收率为90.0～105.0%,RSDs在0.8～4.0%。在pH9.60的NH3-NH4Cl缓冲溶液和PVA-124存在下,A13+和CTMAB作为敏化剂,洛美沙星(LMX)在二氯二甲基硅烷处理的疏水性固载表面上形成自组装环,据此建立了检测LMX的方法。当点样体积为0.2μL时,线性范围为9.87x10-14～1.47x10-12mol-ring-1检出限为9.87×10-15mol-ring-1(4.93×10-8mol·L-1)。实测了盐酸洛美沙星胶囊、片剂、注射液,兔血液、兔肉、肝脏、肾脏中LMX的浓度,加标回收率为90.6～106.3%,RSDs小于4.2%。模拟生理条件下,应用荧光光谱法、紫外-可见吸收光谱法、傅里叶变换红外光谱法研究了TSFX与BSA的相互作用。实验结果表明,TSFX与BSA的作用属于静态猝灭过程,结合常数Kα为2.58×104L·mol-1(298K),结合位点数n≈1,作用力类型主要为静电作用力。根据Foster能量转移理论求得TSFX与BSA第212位色氨酸残基间的距离r=3.42nm。同步荧光光谱和三维荧光光谱数据显示TSFX能够改变BSA的构象,色氨酸残基所处微环境疏水性降低。采用FT-IR对BSA与TSFX作用前后BSA二级结构的变化进行了定量分析,在298K当TSFX:BSA从0∶1变化到10∶1时,α-螺旋从48.5%降低到38.6%,β-折叠从23.3%降低到18.3%,而β-转角从15.3%增加到24.1%,无规卷曲从12.9%增加到19.0%,TSFX与BSA的作用使得BSA的二级结构变得松散。应用荧光光谱法、傅里叶变换红外光谱法和紫外-可见吸收光谱法研究了ATLL与BSA相互作用及Zn2+、Cu2+对ATLL与BSA相互作用的影响。实验表明有无Zn2+、Cu2+存在时ATLL与BSA的作用都是静态猝灭机制。Zn2+使结合作用的有效猝灭常数降低,ATLL的药效增加,而Cu2+增大了有效猝灭常数,使ATLL在血液中的储备时间延长。热力学参数表明氢键和疏水作用力在反应中起主要作用,Zn2+、Cu2+对作用力类型没有影响。根据Foster能量转移理论求出了BSA第212位色氨酸残基与ATLL司的平均距离。应用同步荧光和三维荧光对ATLL对BSA构象的影响进行了研究,表明ATLL改变了色氨酸和酪氨酸残基微环境的极性。红外光谱结果显示ATLL引起了BSA二级结构由α-螺旋和β-折叠结构向β-转角和无规卷曲转变,BSA分子结构的松散程度增加。紫外光谱表明Zn2+对ATLL与BSA相互作用的影响可能是通过Zn2+与ATLL竞争结BSA,而Cu2+可能是形成Cu2+-ATLL复合物,通过离子架桥作用影响BSA与ATLL的作用。应用荧光光谱法、紫外-可见吸收光谱法、傅里叶变换红外光谱法和分子模拟的方法研究了NF与HSA的相互作用。实验结果表明NF对HSA荧光猝灭是一个静态猝灭过程,氢键和范德华力在维持复合物稳定中起主要作用。根据Foster非辐射能量转移理论求出了能量给体(Trp-214)和能量受体(NF)之间的距离r,表明在NF与HSA的相互作用中存在非辐射能量转移。取代实验表明NF在HSA上有一个结合位点位于site I。分子模拟进一步确定了NF在HSA上的具体结合信息,如NF主要是通过NF的N11与Lue283；NF的N14与Lue283、Ser287；NF的O7与Ser287的氢键起作用等。三维荧光光谱显示NF与HSA作用后HSA构象发生改变,色氨酸残基微环境的极性降低。红外光谱结果表明NF与HSA的作用引起HSA二级结构由α-螺旋和β-折叠向β-转角和无规卷曲结构的转变,α-螺旋从54.2%降低到45.8%,β-折叠从18.5%降低到15.7%,β-转角从21.7%增加到23.8%,无规卷曲结构从5.6%增加到14.7%。