活性山茱萸多糖FCP5-A和FCAP1的分离纯化与结构解析

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山茱萸(Cornus officinalis Sieb.et Zucc.)是我国传统中药,具有“补益肝肾,涩精固脱”的功效。随着人们对植物多糖重要生理活性的认识,山茱萸多糖的研究引起了广泛关注。本论文对两种山茱萸多糖的提取、分离纯化、理化性质、结构和体外抗氧化活性进行比较系统的研究,主要包括以下几个部分:1.山茱萸多糖的提取、分离纯化和部分理化性质的研究通过水提取的方法得到水溶性酸性山茱萸粗多糖,经柱色谱分离纯化得到一种酸性山茱萸多糖FCP5-A。对水提取后的残渣通过碱提取的方法得到水溶性中性粗多糖,经进一步的分离纯化得到一种中性山茱萸多糖FCAP1。通过HPLC、GC、IR、紫外分光光度计等仪器对FCP5-A和FCAP1的理化性质进行了研究(表1)。2.山茱萸多糖FCP5-A的结构研究采用糖醛酸还原、甲基化、部分酸水解等方法,结合GC、GC-MS、13C NMR分析,推断FCP5-A的结构呈分支状:主链由→4)GalA(1→2)Rha(1→重复单元构成,部分鼠李糖C4位存在分支。分支由多分支的阿拉伯糖及短链的-3)Gal(1-构成,分支的末端为阿拉伯糖和半乳糖。它为一种新的山茱萸酸性多糖,属于鼠李半乳糖醛酸聚糖-I(RG-I)。3.山茱萸多糖FCAP1的结构研究采用甲基化、部分酸水解、特异酶解等方法,结合GC、GC-MS、MALDI-TOF-MS分析,推断FCAP1为多分支的木葡聚糖:以(1→4)-β-Glc构成主链,部分葡萄糖C6存在分支。支链由Xylp-(1→、Galp-(1→2)-xylp-(1→、Fucp-(1→2)-aalp-(1→2)-Xylp-(1→构成,此外支链上还存在-3)Ara(1-,-4)Glc(1-,-4)Man(1-,-4,6)Man(1-,Ara(1-与Gal(1-。4.山茱萸多糖FCP5-A与FCAP1的体外抗氧化活性研究FCP5-A与FCAP1清除O2·-的能力用邻苯三酚自氧化体系测定,清除·OH的能力用Fenton反应体系测定。FCP5-A与FCAP1均具有清除O2·-和·OH的能力。与FCP5-A相比,FCAP1清除O2·-的能力较弱,而清除·OH的能力较强。FCP5-A经部分酸水解去除阿拉伯糖支链后,其清除O2·-和·OH的能力均明显增强。
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