三种山核桃属植物组织培养技术研究

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本文选用美国山核桃、浙江山核桃、湖南山核桃实生苗和成年树的叶片和带芽茎段为试验材料。文中对最佳培养基筛选、外植体选择、茎段培养、叶片培养及褐化等问题做了较全面系统的试验研究。主要结果如下:1.美国山核桃组织培养中以叶片为试材进行培养时,应选择幼龄叶;叶片培养的最佳培养基为DKW;叶片培养褐化最低激素组合为2,4-D 1.0mg/L+IB A2.0mg/ L+6-BA0.02mg/L。2.美国山核桃组织培养预处理试材防治褐化试验中,采用2%的Na2S2O3溶液浸泡试材20-30min常规灭菌后,再将试材浸泡在经高压灭菌后的0.2%Na2S2O3溶液中,接种时直接取出防治褐化效果最佳;用浓度为300mg/L的PVP预处理试材5min,试材褐化率最低。3.美国山核桃叶片培养抑制褐变反应试验中,将接种后的培养基放入4℃的冰箱中冷藏7d,然后拿到培养室中继续培养,防治褐化效果最好;在培养基中添加5.0mg/LNa2S2O3或浓度为60mg/L以上的PVP,试材褐化率最低。4.在防治污染试验中,用青霉素预处理美国山核桃叶片并且在培养基中添加4g/L多菌灵,可以有效的控制试材的污染率。5.浙江山核桃茎段培养中,最佳芽生长分化和愈伤组织诱导的培养基及激素组合为DKW+IBA2.0mg/L+KT8.Omg/L;叶片培养的最佳培养基及激素组合为WPM+NAA 2.0mg/L+6-BA1.0mg/L。湖南山核桃茎段芽生长分化最佳培养基及激素组合为:DKW+IBA0.5mg/L+KT2.0mg/L;茎段愈伤组织诱导最佳激素组合为:IBA2.0mg/L+KT8.0mg/L;叶片培养的最佳培养基及激素组合为:WPM+NAA 1.5mg/L+6-BA3.0mg/L。两种山核桃组织培养时培养基中添加的最适蔗糖浓度均为30g/L。6.茎尖培养褐化防治试验表明:对于浙江山核桃和湖南山核桃来说,5.0mg/LNa2S2O3添加到培养基中均可有效抑制茎尖褐化。7.在浙江山核桃和湖南山核桃叶片组织培养褐化防治中,在培养基中添加的最佳抗氧化剂及其浓度为:Na2S2O32.0mg/L。在PVP预处理控制褐化试验中,浓度为200mg/L以上的PVP浸泡浙江山核桃叶片组织培养抑制褐变反映效果最佳;浓度为300mg/L以上的PVP浸泡湖南山核桃叶片抑制褐化效果最好。8.继代培养中,适合浙江山核桃和湖南山核桃的培养基为DKW;最佳继代激素组合,浙江山核桃为IBA1.0mg/L+6-B AO.2mg/L,湖南山核桃为IBA2.0mg/L;两种山核桃继代培养培养基的最佳pH为5.8。
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