目的讨论缺血再灌注损伤导致内皮细胞糖蛋白被膜脱落的程度及机理,七氟醚对内皮细胞糖蛋白被膜的保护作用及机理,以及不同处理模式对保护作用的影响。材料与方法本研究采用豚鼠Langendorff离体心脏灌注模型,灌注压固定在70cmH20,灌注液选用改良Krebs-Henseleit液。分两部分进行。第一部分,健康雄性豚鼠42只,随机分为6组,A组为时间对照组,B组为七氟醚处理的时间对照组,c组为缺血再灌注损伤组,D组为用七氟醚预处理的缺血再灌注损伤组,E组为用七氟醚后处理的缺血再灌注损伤组,F组为用七氟醚预处理合并后处理的缺血再灌注损伤组。制备Langendorff离体心脏灌注模型。缺血再灌注损伤组接受20分钟全心停灌暖缺血(37℃),再灌注40分钟。七氟醚预处理组在20分钟暖缺血前接受15分钟2%七氟醚处理,七氟醚后处理组在20分钟暖缺血后在整个再灌注期间接受2%七氟醚处理。再灌注的后20分钟在K-H液中加入1%贺斯。观测指标包括渗出液,流出液的量,渗出液中组胺,肌酸激酶浓度,贺斯浓度,流出液中内皮细胞糖蛋白被膜主要成分-蛋白聚糖-1,硫酸化肝素,透明质酸浓度,乳酸,嘌呤,尿酸浓度。实验结束后,一些心脏被用于蛋白聚糖-1和硫酸化肝素的免疫组化染色,另一些心脏被用于电镜观察糖蛋白被膜的形态。第二部分,健康雄性豚鼠12只,随机分为2组,C组为缺血再灌注损伤组,F组为缺血预处理合并后处理的缺血再灌注损伤组。实验其他条件同前。观测指标为渗出液及流出液中组织蛋白酶B,类胰蛋白酶,不含凝血素的类胰蛋白酶浓度。结果1、缺血再灌注处理能引起渗出液增加,流出液减少,显著增加流出液中乳酸,嘌呤,尿酸浓度以及蛋白聚糖-1,硫酸化肝素,透明质酸浓度和渗出液中肌酸激酶,组胺及贺斯浓度。2、免疫组化染色显示缺血再灌注处理使血管腔内的蛋白聚糖-1和硫酸化肝素染色呈阴性,镧染色电镜观察显示缺血再灌注处理使血管腔内的糖蛋白被膜几乎全部脱落。3、应用七氟醚处理能减少渗出液以及渗出液中贺斯和肌酸激酶含量,但对渗出液中组胺含量没有明显影响。七氟醚处理能增加流出液的量,但对流出液中乳酸,嘌呤,尿酸浓度没有显著影响。七氟醚处理能降低流出液中糖蛋白被膜主要成分的浓度,使免疫组化染色蛋白聚糖-1和硫酸化肝素的染色增强,使电镜观察到的糖蛋白被膜脱落减少。4、七氟醚还能使流出液中组织蛋白酶B浓度降低,对类胰蛋白酶和不含凝血素的类胰蛋白酶浓度无显著影响。5、七氟醚处理的各组之间作用无显著差异。结论1、缺血再灌注处理能使内皮细胞糖蛋白被膜脱落,增加内皮细胞通透性,并能显著增加心肌的氧化应激和无氧代谢,增加心肌细胞肌酸激酶和主细胞组胺的释放,降低心功能。2、七氟醚预处理或后处理能够显著减少内皮细胞糖蛋白被膜的脱落,减少内皮细胞通透性从而降低渗出液中贺斯浓度,降低心肌细胞肌酸激酶的释放,改善再灌注后的心功能。但是对心肌的氧化应激和代谢无显著影响,也不能阻止主细胞释放组胺。在本实验的时间范围内,七氟醚预处理合并后处理不能获得保护作用的增强。3、七氟醚对离体灌流心脏内皮细胞糖蛋白被膜保护作用的机制可能是结合在内皮细胞糖蛋白被膜或者未知蛋白酶的某些活性位点上,改变其结构和功能,从而抑制蛋白酶的释放或者降低蛋白酶的活性,减少酶解性内皮细胞糖蛋白被膜脱落。七氟醚对于主细胞脱颗粒没有显著抑制作用。