谷氧还蛋白(Glutaredoxin，Grx)是细胞内的蛋白质巯基—二硫键氧化还原酶家族的重要组分，在调节体内氧化还原平衡及抵抗氧化应激损伤过程中发挥重要作用。本研究致力pRSETA-Grxl在原核表达载体中表达条件的优化和其功能的检测，以期得到具备生物活性而且高效表达的rhGrxl蛋白，进一步证明其抗氧化的生物学功能。本课题将已构建成功的pRSETA-Grxl融合蛋白表达质粒在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中表达，并从诱导时大肠杆菌菌体密度、诱导剂浓度、诱导时间以及诱导温度等方面进行表达条件的优化，同时检测所表达蛋白的可溶性，用SDS-PAGE和凝胶成像软件进行分析。在成功获得高效表达可溶性目的蛋白的基础上利用Ni-NTA树脂亲和层析纯化该蛋白。胰岛素沉降法检测纯化产物的还原活性，Western印迹测其免疫原性。通过MTT法测细胞存活率，LDH漏出量，SOD活力的变化，证明rhGrxl保护细胞抵抗氧化应激损伤的功能。结果表明，当菌体密度OD<,600>为1.0时开始诱导，加入终浓度0.5mmol/L IPTG，37℃，110±5r/min振荡培养5h，重组蛋白为可溶性，表达量达30％以上。纯化后获得蛋白质纯度达90％以上，浓度约为1.1g/L。活性检测证明该蛋白具有还原活性和免疫原性。MTT及酶学水平检测结果显示rhGrxl对细胞预保护6h，500μ mmol/L H<,2>O<,2>刺激细胞时，rhGrxl浓度为3μg/mL，即能有效的保护由H<,2>O<,2>引起的细胞损伤，rhGrxl在5～45μg/mL范围内对细胞的保护作用与剂量呈依赖关系，在氧化损伤过程中保护了细胞膜的完整性，发挥了抗氧化功能。 本实验结果可用于对该蛋白进一步研究和应用，为进一步的开发生产此蛋白作为研究工具打下了良好的实验基础。