【摘 要】
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目的:探究三叶苷（trilobatin,TLB）对大鼠伤口愈合的作用及其可能的作用机制。方法:体重170-200 g雄性SD大鼠采用简单随机法分为4组:模型组（Model）、模型+TLB 0.05 g/kg组（Model+TLB 0.05 g/kg）、模型+TLB 0.25 g/kg（Model+TLB 0.25 g/kg）、模型+TLB 1.25 g/kg（Model+TLB 1.25 g/kg
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目的:探究三叶苷（trilobatin,TLB）对大鼠伤口愈合的作用及其可能的作用机制。方法:体重170-200 g雄性SD大鼠采用简单随机法分为4组:模型组（Model）、模型+TLB 0.05 g/kg组（Model+TLB 0.05 g/kg）、模型+TLB 0.25 g/kg（Model+TLB 0.25 g/kg）、模型+TLB 1.25 g/kg（Model+TLB 1.25 g/kg）。在大鼠背部正中线肩胛下角2 cm处,用手术刀切除全层皮肤制备半径为1 cm的圆形伤口。取1 g TLB软膏均匀涂抹在伤口处（2次/天）,持续14天。每次处理前观察并拍照记录创面愈合情况,采用相机取固定高度和角度于造模后第0、3、7、10、14天对伤口进行拍照,并用Image J图像分析软件对伤口愈合面积进行换算并统计;给药14天后,采用苏木精-伊红染色观察各组大鼠伤口局部组织细胞浸润的情况;Masson染色观察伤口组织胶原沉积情况;免疫组化法检测大鼠伤口组织中新生血管的数量。酶联免疫吸附试验和免疫荧光法分别检测大鼠血清中炎症因子TNF-α和IL-1β的水平和伤口组织TNF-α和IL-1β的蛋白表达;Western blot法检测NF-κB（p65）、NF-κB（p50）、Akt及其磷酸化水平,VEGFA、VEGFR-2、MMP9、MMP2和TIMP1的蛋白表达。结果:与Model组伤口愈合率86.6%相比,TLB处理组的愈合率（91.3%、93.7%、95%）明显升高,且能增加伤口组织中新生毛细血管、成纤维细胞数量以及表皮生长厚度,并呈剂量依赖性。此外,TLB还可显著降低局部皮肤组织瘢痕面积,减少炎性细胞浸润,明显促进胶原沉积和新生毛细血管生成。与Model组大鼠血清中TNF-α（238.9 pg/m L）以及IL-1β（41.6 pg/m L）相比,TLB（中剂量和高剂量）明显降低大鼠血清中TNF-α（207.1 pg/m L、192.8 pg/m L）水平,TLB（低、中、高剂量）明显降低IL-1β（37.7 pg/m L、35.8 pg/m L、34.2 pg/m L）;模型组伤口组织中TNF-α、IL-1β的阳性表达显著增加,而经TLB处理后TNF-α、IL-1β的表达区域较模型组明显降低。TLB中剂量、高剂量组与Model组相比能够显著下调伤口组织MMP2、MMP9蛋白表达,以及NF-κB（p65）和NF-κB（p50）磷酸化水平降低;TLB能升高伤口组织Akt磷酸化水平,上调VEGFA和VEGFR-2以及TIMP1的蛋白表达量。结论:TLB具有促进大鼠伤口愈合的作用,其作用机制可能与调控MMP9、MMP2/TIMP1平衡,抑制促炎因子释放,促进胶原沉积和血管新生有关。
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