论文部分内容阅读
目的:腰背痛在脊柱疾病中是一类比较常见的疾病,其中又以腰椎间盘突出症(lumbar disc herniation,LDH)作为主要病症,目前广泛认为其是由随年龄增加逐渐发生的椎间盘退变(intervertebral disc degeneration,IVDD)引起,给患者带来很大的生活负担及经济负担。至今椎间盘退变的具体原因及生理生化机制仍未完全明确,广泛认为椎间盘退变与椎间盘中营养物质的供应和代谢的稳定密不可分。已经发现连接蛋白43(Cx43)在维持骨和软骨细胞的营养和代谢的稳定性中起重要作用。本研究基于腰椎间盘退变的病理分级和核磁共振(MRI)的Pfirrmann分级,通过免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)实验、Western blot(WB)实验等方法,检测Cx43在各退化级别的椎间盘组织中的表达变化情况,观察两者之间的相关性,从而证明Cx43与腰椎间盘退变程度有显著相关性。方法:选择川北医学院附属医院骨科收治的符合标准的腰椎间盘突出症患者23例纳入实验组,另将因创伤所致腰椎骨折并行前路开放性手术患者5例纳入对照组,收集患者术中切取的终板及髓核组织。首先采用苏木紫-伊红(Haematoxylin-eosin,H.E)染色观察椎间盘组织退变情况并根据病理学Thompson椎间盘退变分级标准进行分级;其次用影像学Pfirrmann分级标准对患者MRI进行分级;接着分别采用免疫组化、Western Blot方法检测各组共28例患者的终板及髓核组织中Cx43的表达情况;最后将测得的数据用spss23.0软件进行统计及分析,通过两独立样本t检验分析实验组与对照组之间的差异,通过spearman等级相关系数分析椎间盘内Cx43表达量与椎间盘退变程度的相关性,通过配对t检验分析病理学与影像学两种分级间对于评判椎间盘退变程度上存在的差异。结果:1.WB检测Cx43蛋白相对密度值结果,对照组平均0.887±0.147,实验组0.486±0.132,t=6.048,p=0.000<0.05,因此可以认为实验组与对照组WB实验中Cx43表达量存在统计学差异,对照组Cx43表达量显著高于实验组;IHC检测结果,对照组平均0.191±0.056,实验组平均0.055±0.031,t=7.635,p=0.000<0.05,因此可以认为实验组与对照组IHC实验中Cx43表达量存在统计学差异对照组Cx43表达量显著高于实验组。2.病理分级与WB的相关系数R=-0.931,p=0.000<0.05;与IHC的相关系数R=-0.931,p=0.000<0.05;相关性具有统计学意义,并且相关系数较大,认为存在高度负相关,即随着病理等级增高,WB和IHC中目的蛋白表达越低。3.采用配对t检验进行差异性分析,结果显示,t=-3.102,p=0.005,因此可认为影像学分级与病理学分级不同,差异具有统计学意义,且病理学等级平均高出影像学等级0.3个单位。结论:1.Cx43与腰椎间盘退变有明显相关性,正常椎间盘中Cx43表达量明显高于退变椎间盘,且椎间盘退变程度越高,Cx43表达越低,表明Cx43参与了椎间盘退变的过程。2.影像学分级与病理学分级对于评级椎间盘退变程度有差异,病理学分级可能更为准确。3.Cx43或许可成为研究椎间盘退变的早期预防及治疗的新方向,从而减少腰椎间盘突出症或相关椎间盘退行性疾病的发生。