桔小实蝇是世界性的危害水果较严重的害虫，目前已经产生了抗药性，发展形势较为严峻。当前，用于防治桔小实蝇的主要药剂为阿维菌素，但该害虫已经对该药剂产生了一定的抗药性。为了探明桔小实蝇对阿维菌素产生抗药性的原因，笔者借助RT-PCR和RACE技术克隆了桔小实蝇对阿维菌素敏感品系GluCl基因的序列，分析基因序列；通过荧光定量PCR技术，定量分析桔小实蝇敏感品系GluCl基因的mRNA表达量；对桔小实蝇于阿维菌素敏感、抗性品系GluCl基因序列进行扩增，对比分析序列，找到了基因发生突变的位点；对桔小实蝇敏感品系GluCl的一段胞内区进行了原核表达和纯化研究，成功地进行了表达，并获得了纯化的蛋白质；构建了敏感品系GluCl基因的酵母双杂交文库。结果如下：
　　（1）首次对桔小实蝇的阿维菌素敏感品系 GluCl 基因序列全长进行了成功的克隆，该基因的核苷酸序列编码区全长为1377bp，有459个氨基酸参与编码，与其他昆虫GluCl氨基酸序列存在70%到80%的相似性。GluCl受体氨基酸序列信号肽剪切位点位于第 19 位和第 20 位之间，信号肽序列存在二十个氨基酸，具体序列为：MGSGHYIWAIFFFASLCSAS。对GluCl受体进行氨基酸二级结构预测，发现其有129个alpha helix，139个Extended Strand，42个Beta turn，148个Random Coil。在对GluCl受体的跨膜结构进行预测时，发现其存在4个跨膜结构域，与GluCl受体的典型特征相符合，具体包括了TM1/TM2/TM3/TM4，存在半胱氨酸胞外区、跨膜区、C-端胞外区等。第一个跨膜结构在5~22位，包含的氨基酸为：HYIWAIFFFASLCSASLA；第二个跨膜结构在244~266位，包含的氨基酸为：FSYYLIQIYIPCCMLVIVSWVSF；第三个跨膜结构在309~331位，包含的氨基酸为：VWTGVCLTFVFGALLEFALVNYA；第四个跨膜结构在427~449位，包含的氨基酸为：VISRITFPLVFALFNLVYWSTYL。GluCl受体编码蛋白的氨基酸一共有20种，其中占比最多的是leu、Ser和Ile，leu最多，为52个，占氨基酸组成的11.4%；接下来为Ser，为33个，占氨基酸组成的7.2%；Ile为29个，占氨基酸组成的6.3%。对氨基酸序列进行亲水性分析，结果表明序列的N端和C端分别形成了两个亲水性区域，该区域正是对蛋白质修饰和功能化的位点所在，疏水基团多分布在其中部，也即其功能位点所在的区域。对GluCl受体蛋白的分子量和等电点进行预测，其分子量为52452.95D，等电点为8.99。
　　（2）采用荧光定量PCR技术研究了桔小实蝇GluCl基因在各个发育时期和成虫的各个部位中mRNA的表达差异，结果表明：GluCl基因在成虫期的mRNA表达量比其他发育期高，差异显著；成虫足部、头部和胸部的表达量高于腹部和翅部，差异显著。
　　（3）抗性种群相对于敏感种群，氨基酸序列中发生突变的位点有13个。第240位点位于第1与第2跨膜区之间的胞内区上，第262位点位于第2跨膜区上，第325位点位于第3跨膜区上，第334~337、338、339、340、341、342、343、403和420~423位点位于第3与第4跨膜区之间的胞内区上，第432位点位于第4跨膜区上。
　　（4）对GluCl基因第3和第4跨膜区之间的胞内区进行原核表达研究，成功地进行了表达并纯化得到了蛋白，用该蛋白制备了多克隆抗体。用多抗对敏感品系桔小实蝇成虫全虫的粗提蛋白进行了Western Blot检测，检测到了GluCl受体蛋白条带，表明敏感品系桔小实蝇体内存在GluCl受体蛋白。
　　（5）采用pcDNA3.1质粒构建了桔小实蝇敏感品系GluCl基因的真核表达载体，在293细胞中成功地进行了真核表达。
　　（6）构建了桔小实蝇敏感品系 GluCl 基因的酵母双杂交文库，文库质量合格，库容量为4.8×105。