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目的:通过对深圳市坪山区白纹伊蚊密度进行持续性监测,掌握坪山区白纹伊蚊密度、季节消长规律,探讨白纹伊蚊密度(诱蚊诱卵指数、布雷图指数)与气象因素的关系。同时检测坪山区不同生境(工业区、中心区、生态区)白纹伊蚊幼虫抗药性水平,并探讨白纹伊蚊的代谢抗性和靶标抗性机制,为坪山区白纹伊蚊的持续性防控及预防登革热疫情的传播、暴发和流行提供科学依据。方法:1.白纹伊蚊密度监测方法:白纹伊蚊专项监测方法:采用诱蚊诱卵器法。2015-2018年每月随机选取居民区、公园、医院至少各1处布放诱蚊诱卵器。白纹伊蚊幼虫监测方法:采用布雷图指数法。2015年-2018年每月随机选取居民区、外环境(医院、公园、工地)至少各1处做布雷图指数调查。2.白纹伊蚊密度与气象因素关系:在深圳气象局收集2015年1月至2018年12月的气象因素资料(月平均气温、月降雨量、月平均相对湿度),采用Spearman相关分析以及逐步多元回归分析方法对白纹伊蚊密度与气象因素进行分析,探讨白纹伊蚊密度与气象因素的关系。3.白纹伊蚊抗药性检测方法:抗药性检测方法:应用WHO推荐的幼虫浸渍法测定白纹伊蚊幼虫的抗药性,检测坪山区三种生境(工业区、中心区、生态区)白纹伊蚊幼虫对几种常见杀虫剂的抗药性水平。代谢抗性检测方法:采用酶标仪法测定每个种群白纹伊蚊幼虫的非特异酯酶(NSE)、多功能氧化酶(MFO)和谷胱甘肽-S-转移酶(GST)活力,同时通过增效醚(PBO)间接测定白纹伊蚊幼虫细胞色素P450氧化酶(P450s)活力水平,探究代谢抗性机制。基因靶标抗性检测方法:分别将每只白纹伊蚊置于液氮中研磨后提取DNA,然后进行PCR扩增击倒抗性基因(kdr基因)片段,分析白纹伊蚊的kdr基因的突变情况,探究靶标抗性机制。结果:1.白纹伊蚊密度监测结果:白纹伊蚊专项监测结果:坪山区2015-2018年四年的平均诱蚊诱卵指数(MOI)为5.71。对比不同生境的MOI结果,发现公园的MOI最高,医院的MOI最低。坪山区2015-2018年每年的MOI均呈单峰分布,密度高峰主要集中在6-9月。白纹伊蚊幼虫监测结果:坪山区2015-2018年四年的平均布雷图指数(BI)为3.72,平均容器指数(CI)为23.71,平均房屋指数(HI)为2.94。对比两种生境的BI结果,发现每年均为居民区高于外环境。坪山区2015-2018年四年的BI均呈单峰分布,密度高峰主要集中在7-9月。2.白纹伊蚊密度与气象因素的关系:白纹伊蚊密度与气象因素的关系:MOI、BI与月平均气温、月降雨量、相对湿度均呈现正向相关关系(P<0.001)。逐步多元回归分析结果显示:当MOI为因变量时,月平均气温及月降雨量进入回归方程(复相关系数R为0.789,P=0.006)。当BI为因变量时,月降雨量及月平均气温进入回归方程(复相关系数R为0.774,P=0.012)。3.白纹伊蚊抗药性检测结果:坪山区不同生境白纹伊蚊幼虫的抗药性水平:工业区白纹伊蚊幼虫对溴氰菊酯产生高抗性,中心区和生态区幼虫为中抗性,抗性指数为24.13、17.74、18.81;工业区及中心区白纹伊蚊幼虫对高效氯氰菊酯的抗性指数为19.40、16.50,对双硫磷的抗性指数为12.38、18.10,属中抗性,对氯菊酯、残杀威产生低抗性;生态区白纹伊蚊幼虫对高效氯氰菊酯、双硫磷、氯菊酯的抗性指数为7.70、8.82、3.26,属低抗性,对残杀威敏感。白纹伊蚊代谢抗性机制:工业区白纹伊蚊幼虫的NSE、MFO、GST酶活力分别是敏感品系白纹伊蚊幼虫酶活力的1.31、1.56、1.21倍(P<0.05)。中心区和生态区白纹伊蚊幼虫的GST酶活力分别是敏感品系白纹伊蚊幼虫酶活力的1.43、1.19倍(P<0.05)。PBO对工业区、中心区和生态区白纹伊蚊幼虫的增效比分别为1.86、1.79和1.49,说明PBO增强了溴氰菊酯对坪山区白纹伊蚊种群的毒力作用。白纹伊蚊靶标抗性机制:对坪山区共108只白纹伊蚊的kdr基因进行测序,在1534位点发现突变,突变率为5.56%。共发现3种等位基因,5种基因型。工业区白纹伊蚊的kdr基因发生F1534L突变,突变率为4.65%。中心区白纹伊蚊的kdr基因发生F1534L和F1534S突变,总突变率为11.43%。而生态区白纹伊蚊的kdr基因未发生突变。结论:1.深圳市坪山区2015-2018年白纹伊蚊密度较高,在密度高峰期时存在登革热传播风险。白纹伊蚊密度与月平均气温、月降雨量、月平均相对湿度均呈现正向相关关系。对白纹伊蚊密度影响较大的气象因素为月平均气温及月降雨量。2.工业区及中心区白纹伊蚊对杀虫剂的抗药性较高,而生态区较低。工业区白纹伊蚊抗性可能与NSE、MFO、GST及P450s酶活力升高及kdr基因F1534L突变有关。中心区白纹伊蚊幼虫的抗药性可能与GST、P450s酶活力升高及kdr基因F1534S、F1534L突变相关。生态区白纹伊蚊幼虫抗药性可能与GST、P450s酶活力升高有关。3.根据坪山区白纹伊蚊抗药性水平,建议加强定期监测白纹伊蚊抗药性水平及其相关抗性机制,并制定科学合理的蚊虫治理方案。