线性DNA结合细胞穿膜肽的花粉管通道法将AtCKX3导入玉米自交系的研究

被引量 : 0次 | 上传用户:zzz999z
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
干旱是制约农业生产和社会发展的重要问题。暂时或者永久性的干旱胁迫比其他任何逆境因素更能限制作物的产量。玉米是人类的主要粮食来源,也是工业和作为饲料的一种重要资源。但同时玉米是对干旱胁迫很敏感。在干旱胁迫下玉米正常的生长发育受到影响,从而会降低玉米的产量和品质。而我国由于地形的不规则,许多地方都面临着干旱缺水的影响,所以利用转基因技术改善玉米品种来提高玉米的耐旱性能也越来越重要。根系是植物吸收水分和养分以及合成的重要器官,玉米的根系与其抗旱能力密切相关,它的生长情况对植物茎叶等地上部位以及最终产量的形成具有很大的影响。所以我们选择与植物根系生长密切相关的CKX基因进行玉米的转化,以期获得耐旱玉米品种。细胞分裂素氧化酶(CKX)是细胞分裂素代谢途径中的关键酶,它通过调节植物体内细胞分裂素的含量来调控植物的组织器官和根系的生长发育,从而能够促进植物根系的生长。本实验通过花粉管通道法将4tCKX3导入玉米178自交系,以提高玉米的耐旱能力。通过T0、T1以及T2代进行草铵膦除草剂筛选得到122个纯合株系,然后将T2代纯合株系种植于基地抗旱棚中进行耐旱鉴定,选出耐旱能力比较强的8个转基因株系,并且测量它们的根系指标。对纯合株系通过PCR方法证明35Sbar基因以及目的基因CKX3已经成功导入玉米基因组中。通过RT-PCR和Bar-pat试纸条检测证明35Sbar基因以及目的基因CKX3已经成功地在玉米中得到表达。测定旱棚中转基因株系和178自交系的株高、叶面积,千粒重、单穗重等结实情况,结果表明转基因株系极显著好于178自交系。对8个转基因玉米株系和178自交系的苗期根系相关指标根长、侧根数等的测定,发现转基因玉米根系的相关数据要明显好于自交系玉米,并且都达到了显著差异或者极显著差异,表明CKX3基因过表达的转基因纯合株系相比自交系而言,其耐旱能力有所提高。构建PGM-EPSP-AtCKX1/atIAAM/atCKX3/ZmP1P2a表达载体,并经过酶切验证和测序证明质粒载体构建正确。PCR方法获得所需要的线性目的基因,然后纯化回收并且与穿膜肽按质量比1:1混匀,通过花粉管通道法转入玉米自交系572和HZ178中,通过T0代草甘膦筛选获得12个转基因株系,并对T0代转基因植株进行PCR、ddPCR等分子检测,表明EPSP、CKX3基因已经导入玉米自交系中,并且证明EPSP基因在572-3株系、HZ178-1株系中属于单拷贝,能够稳定遗传。
其他文献
非物质文化遗产就是民俗文化,即民众的知识。知识总是与特定的社会主体相关,其生产、使用、传播以及接受等都具有社会性。知识是地方性的,因而也是未完成性及开放性的。非遗
研究发现硫脲基团可以与pDNA上的磷酸基团产生较强的作用。在本研究中,第一步,通过原子转移自由基聚合(ATRP)合成分子量分布较窄的线型和五臂的聚甲基丙烯酸甘油酯(L-PGMA/S5-PGMA
笔者在已有的"比"字句研究成果下,试图通过美国初级学生作文中的"比"字句进行偏误分析,探讨美国学生习得"比"字句的特点和规律,以求更好地指导对外汉语教学实践。
胡蛮的《中国美术史》有两大特点:一是站在马克思主义唯物史观的立场下研究中国美术史;另外一个特别之处在于作者在书中对自己亲历的美术思潮和美术运动的记录和评述,有一种
联合国教科文组织2003年通过的《保护非物质文化遗产公约》和2008年通过的《实施〈保护非物质文化遗产公约〉操作指南》并没有对社区的概念加以明确界定,仅将具体的非物质文
在回顾中西方对比语言学从微观对比语言学到宏观对比语言学的发展历程基础上,探讨对比语言学的核心问题:共性与个性,强调"共性"是人类语言研究的最终目标,也是对比研究的最终
近年来,我国国有企业市场化改革的浪潮风起云涌,国企私有化呼声不断,国企改革也在不断深化之中。自20世纪90年代以来,我国就确定了国有企业改革的方向,就是建立和完善现代企
中国鬼魂文化源远流长,而文人的介入更使得鬼魂形象进入了审美领域。无论是古代小说还是现代文学作品都受到了鬼魂文化的影响。纵观前人对《水浒传》的研究,我们可以发现,这
"传播"这一概念有广义、狭义之分,广义"传播"更符合传播学中"communication"的本意,只有如此,将古代监察纳入传播学视角进行考察才有了依据。"监察"概念的字面意义可以说明其