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荜茇酰胺(Piperlongumine, PL)是一种从长柄胡椒中提取的具有药用价值的天然生物碱。近年来已有研究提示荜茇酰胺对肿瘤细胞具有杀伤作用,本实验室也首次报道了荜茇酰胺对胶质母细胞瘤的杀伤作用。本研究着重于荜茇酰胺对胶质母细胞瘤细胞迁移的作用及其机制,进一步探讨荜茇酰胺抗胶质母细胞瘤的功能及其机制。本研究采用细胞划伤模型证明了荜茇酰胺特异性地抑制肿瘤细胞迁移。利用DCFH-DA染色测定细胞内活性氧水平、微量谷胱甘肽试剂盒测定细胞内谷胱甘肽含量、免疫印迹测钡Tp-p38/p38、p-JNK/JNK蛋白表达水平,探讨了荜茇酰胺对胶质母细胞瘤细胞迁移的抑制作用的潜在分子机制,并采用Transwell迁移实验进行了验证。在机械划伤后用荜茇酰胺处理胶质母细胞瘤细胞系(LN229和U87)能明显抑制划痕的愈合。而在划伤前给予荜茇酰胺(5-10μM)处理6小时可抑制多种肿瘤细胞株(LN229, HepG2, Huh7, Hela, T24)细胞划伤后迁移,而对原代培养的大鼠星形胶质细胞迁移则无影响,EdU实验排除了这一模型中荜茇酰胺对LN229细胞增殖的影响。荜茇酰胺能升高LN229细胞内活性氧(ROS)水平,同时降低还原型谷胱甘肽(GSH)含量但对原代培养的大鼠星形胶质细胞内ROS水平无影响。抗氧化剂N-乙酰基-L-半胱氨酸(NAC)预处理能完全逆转荜茇酰胺对LN229细胞迁移的抑制作用。荜茇酰胺激活LN229细胞内JNK和p38信号通路,而这种激活可被NAC阻断。LN229细胞过表达p38后细胞迁移能力下降,而p38特异性抑制剂SB203580和JNK特异性抑制剂SP600125能明显提高LN229细胞的迁移能力。在Transwell迁移实验中,荜茇酰胺抑制LN229细胞迁移的作用再次被证实,并且这种作用能被NAC逆转,被p38和LNK特异性抑制剂减弱。荜茇酰胺还能增高IKBα的表达,降低NFκB的活性,这种变化同样受NAC及p38和JNK特异性抑制剂的调控。此外,利用免疫印迹检测细胞周期相关蛋白,我们发现荜茇酰胺降低LN229细胞内细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C(cell division cyclin25homolog C,Cdc25C)及Cdc2蛋白的表达,且这种降低能被NAC预处理阻断。自噬相关蛋白LC3也可被荜茇酰胺和NAC调控。这提示草茇酰胺还可通过阻滞细胞周期和诱导自噬发挥其抗胶质母细胞瘤细胞作用。本实验证明了荜茇酰胺通过诱导活性氧水平升高,进而激活JNK和p38,从而抑制胶质母细胞瘤细胞迁移。荜茇酰胺抑制肿瘤细胞迁移及其它抗胶质母细胞瘤的功能可为荜茇酰胺应用于肿瘤预防和治疗提供实验基础。荜茇酰胺对多种肿瘤细胞具有杀伤作用,本研究收集了10例白血病病人血液标本,探索荜茇酰胺对白血病病人细胞的作用及其机制。本研究采用MTT的方法测量荜茇酰胺对白血病病人细胞的活力影响。利用PI染色和流式监测细胞死亡。DCFH-DAA染色测定细胞内活性氧水平。免疫印迹检测p-p38/p38、p-JNK/JNK蛋白表达水平,证明了荜茇酰胺对白血病病人细胞的杀伤功能及潜在分子机制。荜茇酰胺(10-20μM)可抑制白血病病人细胞活力,引起明显的细胞凋亡。荜茇酰胺能升高白血病病人细胞内ROS水平。NAC预处理能完全逆转荜茇酰胺诱导的细胞死亡。荜茇酰胺激活白血病病人细胞内JNK和p38信号通路,而这种激活可被NAC阻断。p38抑制剂SB203580和JNK抑制剂SP600125能明显抑制荜茇酰胺引起的细胞死亡。本实验证明了荜茇酰胺通过诱导活性氧水平升高,进而激活JN和p38,发挥杀伤白血病细胞的作用。