慢性间歇低氧大鼠肺组织损伤及依达拉奉的干预作用

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目的建立间歇低氧大鼠模型,观察各组大鼠肺组织病理、AngⅡ、ACE2、Apelin、MDA活性及SOD含量的变化,探讨慢性间歇低氧对大鼠肺组织损伤的可能机制和自由基清除剂依达拉奉的干预作用及其可能机制。方法96只雄性Wistar大鼠,采用随机数字表法分为:正常对照组(NC组)、5%间歇低氧组(CIH组)、依达拉奉组(NE组)、生理盐水对照组(NS组),每组24只大鼠。实验结束后,观察各组大鼠肺组织病理(HE)变化;血气检测血氧分压(PO2);化学法测肺组织匀浆液中MDA含量、SOD活性;免疫组化法测肺组织AngⅡ、ACE2、Apelin蛋白表达量;PCR测大鼠肺组织匀浆液中AngⅡm RNA水平。结果1各组大鼠血气分析结果:CIH组、NE组、NS组大鼠最低血氧分压为37.6mm Hg、35.8 mm Hg、36.2 mm Hg,NC组血氧分压维持于98-100 mm Hg。2各组大鼠肺组织MDA活性、SOD含量变化:CIH组、NE组及NS组随间歇低氧时间延长,SOD活性逐渐下降,MDA含量逐渐升高,于4w达其峰值,而NC组各时间点MDA活性、SOD含量无显著变化。各组间同一时间点比较,CIH、NS及NE各组大鼠肺组织SOD活性明显低于NC组,同时CIH、NS及NE组MDA含量显著高于NC组(P<0.05);NE组SOD活性明显高于NS组及CIH组,NE组MDA含量明显低于NS组及CIH组(P<0.05)。3各组大鼠肺组织病理(HE):NC组24只大鼠肺组织超微形态结构未见明显异常;CIH组、NE组、NS组自1w开始出现肺泡水肿及部分肺泡萎陷不张,肺间质及支气管粘膜上皮可见中性粒细胞浸润,且随时间延伸这种病理损伤越重,4w时肺损伤最重;各组间同一时间点比较,与NC组相比,CIH组、NS组及NE各组大鼠肺组织可见明显的病理损伤;与NS、CIH组相比,NE组肺组织肺泡壁水肿较之减轻,肺间质及支气管粘膜上皮的中性粒细胞亦减少。4大鼠肺组织Ang II蛋白表达:CIH组、NE组及NS组随间歇低氧时间延长,肺组织Ang II蛋白IOD值逐渐升高,于4w达其高峰,而NC组各时间点IOD基本相同。同一时间点不同组相互比较:与NC组比较,CIH组、NE组及NS大鼠在各时间点肺组织Ang II蛋白表达IOD值均高于NC组(P<0.05);与NS组、CIH组比较,NE组在个时间点肺组织钟Ang II蛋白IOD值均低于NS组及CIH组(P<0.05)。5大鼠肺组织ACE2蛋白表达结果:NC组各时间点肺组织ACE2蛋白IOD值无差异,CIH组及NS组随间歇低氧时间的延长,在1w、2w肺组织ACE2蛋白表达IOD值先逐渐增高,于2w达高峰后在3w、4w时IOD值呈现逐渐下降趋势;NE组肺组织ACE2蛋白表达IOD值逐渐升高,于4w达其高峰。同一时间点不同组比较:与NC组比较,CIH、NS组及NE组大鼠各时间点ACE2蛋白IOD值均高于NC组(P<0.05);与NS及CIH组比较,NE组在第1w、2w ACE2蛋白IOD值均低于NS及CIH组(P<0.05),3w无明显差异(P>0.05),而4w肺组织ACE2蛋白IOD值高于NS及CIH组(P<0.05)。6大鼠肺组织Apelin蛋白表达结果:NC组各时间点肺组织中Apelin蛋白IOD值无显著变化,CIH组及NS组随时间延长,在1w、2w肺组织Apelin蛋白表达IOD值呈逐渐减少趋势,于2w达最低后在3w、4w时IOD值呈逐渐升高,NE组肺组织Apelin蛋白IOD值自3w逐渐升高,于4w达高峰。同一时间点不同组比较:与NC组比较,CIH组及NS大鼠在第1w、2w Apelin蛋白表达IOD值均低于NC组(P<0.05),3w时与NC组无明显差异(P>0.05),而4w时IOD值高于NC组(P<0.05),而NE组第1w、2w Apelin蛋白IOD值与NC组无显著差异,3w、4w时Apelin蛋白IOD值高于NC组;与NS组、CIH组比较,NE组大鼠在各时间点Apelin蛋白IOD值均高于NS组及CIH组(P<0.05)。7大鼠肺组织AngⅡm RNA水平:CIH组、NE组、NS组随间歇低氧时间的延长,肺组织AngⅡm RNA水平呈逐升高趋势,于4w达其高峰值;NC组各时间点无明显变化。同一时间点不同组比较:与NC组比较,CIH、NS及NE组大鼠各时间点肺组织Ang IIm RNA水平均高于NC组(P<0.05);与NS、CIH组比较,NE组时间点肺组织Ang IIm RNA水平均低于NS组及CIH组(P<0.05)。8相关性分析:CIH组Ang IIm RNA与MDA呈正相关(r=0.782,P<0.01),Ang IIm RNA与SOD呈负相关(r=-0.804,P<0.01);NE组Ang IIm RNA与MDA呈正相关(r=0.876,P<0.01),Ang IIm RNA与SOD呈负相关(r=-0.866,P<0.01)。结论1慢性间歇低氧可导致大鼠肺组织损伤。2间歇低氧诱发的肺组织氧化应激与RAS系统失衡密切相关。3抗氧化剂依达拉奉可通过减轻氧化应激、维持RAS平衡而减轻间歇低氧致肺损伤。
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